Фосфо-PLN-S16 кроличья поликлональная антитело для ВБ и ИФА - P26678

Основные технические характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация фосфоламбана

• Фосфоламбан (PLN) представляет собой трансмембранный фосфопротеин с молекулярной массой 6,1 кДа, который обратимо ингибирует Са2+-АТФазу SERCA2 в саркоплазматическом ретикулуме сердца, снижая кажущуюся аффинность помпы к кальцию, тем самым регулируя сердечную сократимость и расслабление (PubMed:28890335). Связанные публикации: PMID:28890335
• PLN преимущественно связывается с АТФ-связанной конформацией E1 SERCA2, которая доминирует при низких диастолических концентрациях Ca2+, и нарушает аллостерическую активацию АТФ, замедляя обратный захват Ca2+ во время диастолы.
• Помимо SERCA2, PLN также ингибирует SERCA3 и участвует в поддержании кальциевого гомеостаза в удлиненных сперматидах и ретикулярном ядре таламуса, что потенциально влияет на дифференцировку половых клеток и циклы сна/бодрствования.
• Фосфорилирование PLN по Ser16 (и Thr17) протеинкиназами, такими как PKA и CaMKII, снимает ингибирование SERCA2, являясь важным регуляторным узлом в β-адренергической сигнализации и регуляции сердечной сократимости.
• Субклеточно PLN локализован в мембране саркоплазматического/эндоплазматического ретикулума и митохондриальной мембране, обеспечивая его регуляторные функции в органеллах, отвечающих за гомеостаз кальция.
• PLN экспрессируется преимущественно в сердечной мышце; мутации в гене PLN вызывают наследственные кардиомиопатии, включая дилатационную кардиомиопатию (CMD1P) и гипертрофическую кардиомиопатию (CMH18).
• Белок подвергается множеству ковалентных модификаций — пальмитоилированию, ацетилированию и фосфорилированию — которые влияют на его олигомерное состояние, закрепление в мембране и регуляторную активность.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуногеном является синтетический фосфопептид, соответствующий участку вокруг Ser16 PLN человека; такая конструкция обеспечивает обогащение антителами, распознающими фосфорилированный эпитоп. Для ИФА и Вестерн-блоттинга рекомендуется использовать нефосфорилированный пептид или лизаты, обработанные фосфатазой, в качестве негативных контролей для подтверждения специфичности к фосфорилированной форме.
• Из-за низкой молекулярной массы PLN (~6 кДа) стандартные условия электрофореза в ПААГ-СДС могут не обеспечить эффективное разделение белка; для детекции в Вестерн-блоттинге рекомендуется использование гелей с высоким процентом акриламида (например, 15–20%) или Трицин-СДС-ПААГ электрофорез.
• Как указано, антитело обладает перекрестной реактивностью с PLN мыши и крысы; рекомендуется валидация детекции эндогенного фосфорилированного PLN в лизатах сердечной ткани этих видов, так как PLN высоко экспрессируется в сердце.
• Для ИФА поликлональная природа антитела из кролика может обеспечивать высокочувствительный захват/детекцию; однако для количественных анализов необходимо проверять консистентность результатов между разными сериями продукта.
• Поскольку фосфорилирование PLN регулируется динамически, для сохранения сигнала фосфо-S16 необходима правильная подготовка образцов с добавлением ингибиторов фосфатаз.

CamelBio: ваш единый центр по закупке реагентов

CamelBio предоставляет производителям диагностических систем и исследователям упрощенный доступ к высококачественным исходным материалам для ИВД, включая фосфориляционно-специфические антитела, такие как это анти-фосфо-PLN-S16 поликлональное антитело. Наш обширный портфель продуктов поддерживает разработку кардиоваскулярных биомаркеров за счет валидированных пар антител, крупных партий вспомогательных реагентов и индивидуального поиска редких мишеней, помогая вам ускорить разработку анализа от концепции до клинического применения.