Кроличья поликлональная антитело к фосфорилированному Phospho-p90Rsk/RSK1/RPS6KA1-T359/S363 для Вестерн-блоттинга (WB) и ИФА (ELISA) - Q15418

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический фон: функция и локализация RPS6KA1/RSK1

• Идентификация белка: RPS6KA1 кодирует рибосомный белок S6 киназу альфа-1 массой 90 кДа (RSK1/p90RSK), серин/треониновую киназу семейства p90RSK; альтернативный сплайсинг генерирует множество изоформ.
• Эффектор пути ERK-MAPK: Функцирует ниже по потоку от ERK1/2, фосфорилируя факторы транскрипции CREB1, ETV1/ER81, NR4A1/NUR77 и кофактор CREBBP, способствуя экспрессии ранних генов и митогенезу.
  Связанные ссылки: PMID:18508509 PMID:18813292 PMID:12213813 PMID:16223362
• Инициация трансляции: Усиливает кэп-зависимую трансляцию путем фосфорилирования RPS6 и EIF4B в ответ на инсулин или факторы роста.
  Связанные ссылки: PMID:16763566 PMID:17360704
• Модулятор сигнального пути mTOR: Регулирует активность mTORC1 и mTORC2 посредством фосфорилирования TSC2 и RPTOR, а также участвует в обратной связи через DEPTOR.
  Связанные ссылки: PMID:15342917 PMID:22017876
• Антиапоптотические эффекты: Ингибирует проапоптотические белки BAD и DAPK1 и способствует выживанию stellate клеток печени и гепатоцитов посредством фосфорилирования CEBPB.
  Связанные ссылки: PMID:10679322 PMID:16213824 PMID:11684016 PMID:18508509 PMID:18813292
• Миграция клеток: Фосфорилирует EPHA2 по Ser-897 для контроля подвижности клеток.
  Связанные ссылки: PMID:26158630
• Субклеточная локализация и регуляция: Перемещается между ядром и цитоплазмой; киназная активность контролируется мульти-сайтовым фосфорилированием, включая остатки Thr359 и Ser363, важные для активации и распознаваемые данным антителом.

Экспериментальное руководство и технические советы

• Это фосфоспецифическое антитело было получено с использованием синтетического пептида, несущего фосфорилированные остатки Thr359 и Ser363. Для Вестерн-блоттинга подтвердите специфичность путем предварительной инкубации антитела с нефосфорилированным пептидом или обработкой образцов лямбда-фосфатазой перед иммуноблоттингом.
• При Вестерн-блоттинге (WB) используйте мягкие или не содержащие фосфатов блокирующие буферы (например, БСА или сухое обезжиренное молоко без ингибиторов фосфатазы), чтобы сохранить распознавание антигена. Эмпирически оптимизируйте разведение первичного антитела (обычно 1:500–1:2000) для вашего типа образца и системы детекции.
• Для ИФА (ELISA) нанесите фосфопептид или экстракт белка и титруйте антитело для достижения оптимального соотношения сигнал/шум. Рассмотрите возможность использования нефосфорилированного пептида в качестве отрицательного контроля.
• Индуцируйте фосфорилирование RPS6KA1 в линиях клеток человека путем обработки EGF (50 нг/мл) или инсулином (100 нМ) в течение 15–30 минут перед лизисом, так как RSK1 сильно активируется путем ERK.
• Перекрестная реактивность была продемонстрирована для образцов человека; для других видов проверьте идентичность последовательности области иммуногена перед использованием.

CamelBio: Ваш мост для комплексного снабжения

CamelBio предоставляет комплексный сервис по закупке сырья для IVD, предлагая валидированные пары антител, моноклональные/поликлональные антитела и вспомогательные реактивы оптом для разработки иммуноанализов. Для исследователей, изучающих каскад сигнального пути MAP-киназы, мы поставляем фосфоспецифические и пан-антитела к ключевым мишеням, таким как RPS6KA1/RSK1. Пусть CamelBio станет вашим партнером на пути от открытия мишени до диагностического применения, обеспечивая технические консультации и надежные цепочки поставок.