Фосфо-p70 S6 Киназа 1-T421/S424 Кроличьи мАт для Вестерн-блоттинга, ИФ/ИЦК, ИФА - P23443

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическое предыстория: Функция и локализация RPS6KB1 (p70 S6 Киназа 1)

• RPS6KB1 (p70 S6 киназа 1) — это серин/треониновая протеинкиназа, которая функционирует как ключевой нижестоящий эффектор сигнального пути mTOR, регулируя рост клеток, пролиферацию и выживаемость. Связанные ссылки: PMID:11500364, PMID:12801526, PMID:14673156
• Киназа активируется посредством многосайтового фосфорилирования, при этом фосфорилирование, опосредованное mTORC1, по остаткам Thr-421/Ser-424 (расположенным в аутоингибиторном домене) играет критическую роль в ее активации. При митогенной стимуляции это фосфорилирование вызывает диссоциацию от комплекса инициации трансляции EIF3 и последующую активацию киназы. Связанные ссылки: PMID:16286006
• Она стимулирует синтез белка путем фосфорилирования компонентов трансляционного аппарата, включая EIF4B, RPS6 и EEF2K, а также усиливает инициацию трансляции путем инактивации репрессора EIF4A — PDCD4. Связанные ссылки: PMID:11500364, PMID:12801526, PMID:14673156, PMID:17053147
• RPS6KB1 участвует в обратной регуляции сигнального пути mTOR путем фосфорилирования компонентов mTORC2 MAPKAP1/SIN1 и RICTOR, а также компонента mTORC1 DEPTOR, тем самым модулируя активность AKT1. Связанные ссылки: PMID:15899889, PMID:19720745, PMID:19935711, PMID:22017876
• Она опосредует выживание клеток путем фосфорилирования и ингибирования проапоптотического белка BAD, а также путем регуляции динамики митохондриального комплекса URI1-PPP1CC. Связанные ссылки: PMID:17936702
• Внутриклеточно она локализуется в цитоплазме, ядре, митохондриях и внешней мембране митохондрий, а также в синаптических компартментах, что отражает ее разнообразные регуляторные роли.
• Белок широко экспрессируется в тканях человека, что подчеркивает его фундаментальную роль в клеточном гомеостазе.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Для вестерн-блоттинга ожидается полоса размером примерно 59 кДа. Проверьте специфичность с использованием лизатов, обработанных фосфатазой, или путем конкуренции с нефосфорилированным пептидом.
• При иммунофлуоресценции оптимизируйте условия фиксации и пермеабилизации для сохранения фосфо-эпитопа; рассмотрите возможность проведения тестов с голоданием сыворотки и стимуляцией для визуализации изменений локализации, зависящих от активации.
• Для применения в ИФА используйте покрытие целевым фосфо-пептидом или сэндвич-формат для захвата и обнаружения фосфо-p70 S6K, обеспечивая распознавание специфического фосфорилирования детектирующим антителом.
• При расширении применения на образцы мыши или крысы проверьте перекрестную реактивность в соответствующей ткани или клеточной линии, так как гомология последовательностей может влиять на связывание.
• Дизайн иммуногена (синтетический фосфо-пептид в области T421/S424) обеспечивает фосфо-специфичность; всегда подтверждайте это путем обработки образцов лямбда-фосфатазой или с использованием контроля нефосфо-антителом.

CamelBio: Ваш комплексный мост для закупок

CamelBio выступает в качестве комплексного партнера для производителей диагностических средств и исследовательских институтов, предоставляя интегрированный доступ к сырью для IVD. Для исследователей, изучающих сигнальный путь mTOR и контроль трансляции, мы предлагаем ряд валидированных антител и вспомогательных реагентов для поддержки разработки анализов. От оптимизированных моноклональных и поликлональных антител до оптом поставляемых вспомогательных реагентов и поиска редких мишеней — CamelBio оптимизирует процесс закупок от концепции до клиники.