Phospho-NFKB1-S337 Rabbit PolymAb® для Вестерн-блоттинга - P19838

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическое обоснование: функция и локализация NFKB1

• NFKB1 кодирует предшественник p105, который подвергается протеасомной обработке с образованием активной субъединицы p50 комплекса транскрипционного фактора NF-κB (PubMed:1423592). Связанные ссылки:
  PMID:1423592

• Субъединица p50 образует гомо- или гетеродимеры с другими членами семейства NF-κB/Rel, такими как RELA/p65, RELB и REL, связываясь с консенсусной последовательностью ДНК κB 5'-GGRNNYYCC-3' для регуляции экспрессии генов (PubMed:1740106, PubMed:7830764). Связанные ссылки:
  PMID:1740106
  PMID:7830764

• NF-κB является центральным медиатором иммунного и воспалительного ответов, роста клеток, дифференциации и апоптоза, причем гетеродимер p65-p50 является наиболее распространенным и транскрипционно активным комплексом.

• Неактивные димеры NF-κB удерживаются в цитоплазме ингибиторами IκB; при стимуляции IκB фосфорилируется и деградирует, что позволяет NF-κB транслокироваться в ядро и активировать гены-мишени.

• NFKB1 также функционирует как якорь удержания в цитоплазме через p105 для связанных белков NF-κB и в комплексе с MAP3K8 подавляет сигнальный путь MAPK до тех пор, пока деградация p105 не высвободит активный MAP3K8.

• Белок подвергается множественным посттрансляционным модификациям, включая фосфорилирование, ацетилирование, убиквитинирование и гидроксилирование, которые модулируют его активность, стабильность и внутриклеточную локализацию.

• Внутриклеточная локализация включает как цитоплазму, так и ядро, что отражает его двойную роль в секвестрации сигнала и транскрипционной регуляции.

• Альтернативные изоформы, образующиеся в результате альтернативного сплайсинга, вносят вклад в функциональное разнообразие; белок полной длины p105 (105 кДа) и процессированная субъединица p50 (50 кДа) обнаруживаются в большинстве типов клеток.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Учитывая фосфоспецифическую природу этого антитела, необходимо включать ингибиторы фосфатаз в лизирующие буферы для сохранения сигнала фосфорилирования при подготовке образцов.
• Для Вестерн-блоттинга рекомендуется использовать положительный контроль с известной активацией пути NF-κB (например, клетки, обработанные TNF-α); следует проверить обнаружение полос около 105 кДа (p105) и 50 кДа (p50).
• При иммуногистохимии условия восстановления антигена и разведение антитела должны быть оптимизированы; убедитесь, что картина окрашивания отражает ожидаемую ядерную/цитоплазматическую локализацию при активации пути.
• Антитело подходит для ИФА (ELISA); рассмотрите возможность использования фосфорилированного пептида в качестве стандарта для количественных анализов.

CamelBio: Ваш мост для закупок полного цикла

CamelBio предлагает производителям диагностических средств и исследовательским лабораториям комплексное решение для закупки сырья для IVD, включая это антитело Phospho-NFKB1-S337 и широкий портативфель реагентов, связанных с путем NF-κB. Поддерживая проекты от концепции до клиники, мы предоставляем валидированные пары антител, моноклональные/поликлональные антитела оптом и вспомогательные реагенты, обеспечивая стабильные поставки для высокопроизводительных иммуноанализов. Наш опыт в поиске редких мишеней и индивидуальной разработке позволяет оптимизировать закупки для ваших исследований и диагностических применений, связанных с NF-κB.