Фосфо-NFKB1 (S337) Кроличье поликлональное антитело для Вестерн-блоттинга, ИФА - P19838

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация NFKB1

• NFKB1 кодирует предшественник p105, который подвергается ко- и пост-трансляционному процессингу, опосредованному протеасомой, с образованием активной субъединицы p50. p50 формирует гомо- или гетеродимеры с другими членами семейства NF‑κB (RELA, RELB, REL, NFKB2). Связанные ссылки: PMID:1423592
• Гетеродимер p65‑p50 является наиболее распространенным комплексом NF‑κB и действует как транскрипционный активатор, связываясь с консенсусными участками κB (5′‑GGRNNYYCC‑3′) в энхансерах генов иммунного ответа и острой фазы. Связанные ссылки: PMID:1740106 PMID:7830764
• Гомодимер p50‑p50 функционирует как транскрипционный репрессор, но может переключаться на активатор при ассоциации с BCL3. NFKB1 p105 также удерживает белки NF‑κB в цитоплазме, тем самым контролируя их транслокацию в ядро.
• Сигналинг NF‑κB строго регулируется пост-трансляционными модификациями, включая фосфорилирование, ацетилирование, S-нитрозилирование и убиквитинирование. NFKB1 является фосфопротеином; события фосфорилирования модулируют его стабильность, процессинг и транскрипционную активность.
• NFKB1 широко экспрессируется, особенно в иммунных клетках, и играет центральную роль в воспалении, иммунитете, апоптозе и пролиферации клеток.
• Белок в основном локализуется в цитоплазме в покоящихся клетках. После активации и деградации ингибиторов IκB освободившиеся димеры транслоцируются в ядро для индукции экспрессии генов-мишеней.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуногеном является синтетический фосфорилированный пептид, соответствующий области вокруг S337 белка NFKB1 человека. Для сохранения фосфорилированного сигнала во время подготовки образцов включайте ингибиторы фосфатаз в лизирующие буферы и избегайте длительных инкубаций при повышенных температурах.
• При Вестерн-блоттинге ожидайте основные полосы примерно при ~50 кДа (субъединица p50) и ~105 кДа (предшественник p105). Благодаря перекрестной реактивности с ортологами мыши и крысы, антитело можно использовать для этих видов, но оптимальное разведение следует определять эмпирически.
• Антитело валидировано для Вестерн-блоттинга и ИФА. При проведении ИФА рассмотрите сэндвич-формат или конкурентный дизайн анализа и проверьте специфичность с использованием контроля не-фосфорилированного пептида.
• Активацию NF‑κB можно индуцировать широким спектром стимулов (например, TNF‑α, LPS, IL‑1β). По возможности включайте положительные контроли из стимулированных клеток и образец, обработанный фосфатазой или дефосфорилированный, чтобы подтвердить зависимость сигнала от фосфорилирования.

CamelBio: Ваш мост к комплексным поставкам

CamelBio предоставляет производителям диагностических систем, лабораториям и исследовательским институтам надежный единый доступ к сырьевым материалам для ИВД. Это антитело к Фосфо‑NFKB1‑S337 поддерживает исследования передачи сигнала NF‑κB, воспаления и связанных патологий. Помимо отдельных реагентов, CamelBio может поставлять валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, вспомогательные реагенты оптом, а также осуществлять индивидуальный поиск сырья для редких или нишевых мишеней, упрощая ваш путь от концепции до клиники.