Фосфо-NF-κB p65/RelA (Ser468) Кроличье поликлональное антитело для Вестерн-блоттинга, ИФА - Q04206

Основные характеристики и параметры продукта

Биологическая справка: Функция и локализация NF-κB p65/RelA

• NF-κB p65 (также известный как RelA, NFKB3) является субъединицей транскрипционного факторного комплекса NF-κB и принадлежит к семейству белков, содержащих Rel-гомологичный домен, которое включает RELA, RELB, REL, NFKB1/p105 и NFKB2/p52.
• Канонический гетеродимер NF-κB RELA-NFKB1 связывается с κB-сайтами ДНК для активации генов, участвующих в воспалении, иммунитете, росте клеток, дифференцировке и апоптозе.
• p65/RelA образует как активирующие гетеродимеры (например, RELA-NFKB1), так и гомодимеры (RELA-RELA), последние участвуют в опосредованной инвазином экспрессии IL-8.
• Субклеточная локализация в основном цитоплазматическая в неактивном состоянии, связанном с ингибиторами IκB; после активации транслоцируется в ядро для регуляции транскрипции.
• p65 подвергается обширным посттрансляционным модификациям, включая фосфорилирование, ацетилирование, метилирование, убиквитинирование и S-нитрозилирование, которые модулируют его активность и стабильность.
• Фосфорилирование по Ser468 (и другим остаткам) участвует в тонкой настройке транскрипционной активности и белковых взаимодействий.
• RelA необходим для экспрессии генов цитокинов в Т-клетках. Связанные ссылки: PMID:15790681
• Выступает в качестве ключевого транскрипционного фактора в интерфероновом ответе во время инфекции SARS-CoV-2. Связанные ссылки: PMID:33440148

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Данное антитело получено против синтетического фосфопептида вокруг Ser468; следовательно, оно специфично распознает фосфорилированную форму p65/RelA. Для точного детектирования включайте ингибиторы фосфатаз в лизирующие и промывочные буферы.
• Для подтверждения фосфоспецифичности обработайте образцы лямбда-протеинфосфатазой и сравните сигналы полос при Вестерн-блоттинге; исчезновение сигнала указывает на зависимость от фосфорилирования.
• Для Вестерн-блоттинга проводите SDS-PAGE в восстановительных условиях и используйте соответствующие контроли (например, лизаты нестимулированных клеток против стимулированных, в которых известна активация NF-κB).
• Для ИФА антитело может использоваться в качестве захватывающего или детектирующего реагента; валидируйте его сочетание с неспецифичным к фосфорилированию антителом к p65 для сэндвич-ИФА.
• Учитывайте указанную перекрестную реактивность с образцами крысы, однако валидируйте в вашей конкретной экспериментальной модели.

CamelBio: Ваш универсальный мост для поиска реагентов

CamelBio выступает в качестве комплексного партнера для поиска сырья для ИВД, предоставляя валидированные фосфоспецифичные антитела, такие как этот продукт для NF-κB p65/RelA, для поддержки исследований в области воспаления и передачи сигналов. Наш портфель включает оптимизированные пары антител, реагенты оптом и поиск реагентов для редких мишеней, давая возможность разработчикам диагностических систем и исследователям упростить разработку анализов от концепции до клиники.