Фосфо-специфическое кроличье моноклональное антитело к Phospho-NF-κB p105 (Ser932) для ВБ, ИФА - P19838

Основные характеристики и параметры продукта

Биологическая справка: функция и локализация NF-κB p105

• Ген NFKB1 кодирует предшественный белок p105, который после протеолитической обработки образует активную субъединицу p50 транскрипционного фактора NF-κB (PubMed:1423592). Связанные источники: PMID:1423592
• Субъединица p50 связывается с RELA/p65 с образованием гетеродимера p65-p50 — наиболее распространенного комплекса NF-κB, который связывается с участками κB (5'-GGRNNYYCC-3') в промоторах генов-мишеней и активирует транскрипцию (PubMed:1740106, PubMed:7830764). Связанные источники: PMID:1740106, PMID:7830764
• NF-κB — плейотропный фактор транскрипции, играющий центральную роль в иммунном ответе, воспалении, апоптозе и пролиферации клеток. Его активность регулируется ингибиторными белками IκB и разнообразными стимулами.
• Белок p105 содержит N-концевую гомологичную домен Rel (RHD) и C-концевые анкириновые повторы; он функционирует как фактор удержания в цитоплазме для димеров NF-κB, изолируя их в неактивном состоянии.
• После поступления активационного сигнала киназы IκB (IKK) фосфорилируют IκB, что приводит к его деградации и высвобождению димеров NF-κB, которые затем транслоцируются в ядро и модулируют экспрессию генов.
• Гомодимеры p50 действуют как репрессоры транскрипции, если не связываются с BCL3, что подчеркивает специфичную для разных димеров регуляторную гибкость NF-κB.
• Посттрансляционные модификации, включая фосфорилирование, ацетилирование, убиквитинирование и S-нитрозилирование, тонко регулируют активность NF-κB; фосфорилирование по остаткам серина (например, S932) участвует в процессинге и активации p105.
• По субклеточной локализации p105 преимущественно находится в цитоплазме, тогда как активные димеры, содержащие p50, транспортируются между цитоплазмой и ядром.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген представляет собой синтетический фосфопептид, соответствующий остаткам в области Ser932 человеческого NF-κB p105. При проведении вестерн-блота ожидается основная полоса размером примерно 105 кДа (p105) и возможно полоса размером около 50 кДа (p50). Для подтверждения фосфориляционной специфичности обработайте лизаты фосфатазой или проведите сравнение с нефосфо-специфическим антителом.
• Для применения в ИФА определите титр и оптимизируйте концентрацию антитела с использованием фосфорилированного пептида или лизатов стимулированных клеток. Включите соответствующие стадии блокировки для снижения неспецифического связывания.
• Учитывая перекрестную реактивность антитела с мышиными и крысиными белками, в качестве положительного контроля рекомендуется использовать релевантные клеточные линии (например, Jurkat, HeLa, RAW 264.7). Индукция сигнального пути NF-κB с помощью TNF-α, ЛПС или PMA/иономицина может улучшить эффективность детекции.
• Всегда используйте маркеры молекулярной массы и подходящие контроли для подтверждения специфичности, поскольку белки семейства NF-κB имеют высокую степень гомологии.

CamelBio: ваша единая платформа для поиска реагентов

CamelBio предоставляет производителям диагностических систем и исследовательским институтам полный ассортимент сырьевых материалов для ИВД, включая высококачественные фосфо-специфические антитела, такие как это моноклональное антитело к NF-κB p105-S932. Обладая экспертизой в области воспаления и иммунного сигналинга, мы предлагаем валидированные пары антител, моноклональные/поликлональные антитела в больших объемах и вспомогательные реагенты для ускорения разработки ваших тест-систем. Независимо от того, нуждаетесь ли вы в оптимизированных реагентах для изученных мишеней или поддержке в поиске редких специфичностей, наша единая платформа преодолевает разрыв от концепции до клинического применения.