Кроличье моноклональное антитело Phospho-MLKL-S345 для WB, IP, ELISA — Q9D2Y4

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический фон: функции и локализация белка, подобного киназе смешанной линейной группы

• Белок, подобный киназе смешанной линейной группы (MLKL), представляет собой псевдокиназу, играющую ключевую роль в некроптотической гибели клеток. Возможно существование изоформы, образующейся в результате альтернативного сплайсинга.
• MLKL является конечным эффектором некроптоза, индуцированного TNF. После фосфорилирования RIPK3 он образует гомотримеры, перемещается к плазматической мембране и запускает поступление кальция и разрыв плазматической мембраны, осуществляя запрограммированный некроз. Связанные публикации: PMID:23835476, PMID:24012422, PMID:24019532
• Несмотря на наличие домена, подобного киназному, MLKL не обладает активностью протеинкиназы и функционирует как псевдокиназа. Связанные публикации: PMID:24012422
• В ответ на инфекцию орттомиксовирусом ядерный MLKL может активироваться белками ZBP1 и RIPK3, что приводит к нарушению целостности ядерной оболочки и выходу иммуногенной ДНК в цитозоль. Связанные публикации: PMID:32200799, PMID:32296175
• MLKL преимущественно локализуется в цитоплазме, но в зависимости от состояния активации может связываться с клеточной мембраной и ядром.
• MLKL высоко экспрессируется в тимусе, ободочной кишке, кишечнике, печени, селезёнке и лёгких; более низкий уровень экспрессии наблюдается в скелетных мышцах, сердце и почках, а в мозге белок отсутствует.
• MLKL содержит домен с коил-коиловой структурой и сайт связывания АТФ, хотя не проявляет киназной активности. Это фосфопротеин, регулируемый множественными событиями фосфорилирования.

Рекомендации по экспериментам и технические советы

• Иммуногеном является синтетический фосфопептид, соответствующий участку S441 мышиного MLKL; специфичность антитела следует подтвердить обработкой образцов фосфатазой лямбда или с помощью конкуренции с нефосфорилированным пептидом.
• Для вестерн-блоттинга ожидается полоса примерно на уровне 54 кДа. Используйте соответствующие положительные контроли, например лизаты мышиных клеток, обработанных стимуляторами некроптоза (например, TNF+ZVAD+миметик SMAC).
• При иммунопреципитации рекомендуется предварительное осветление образцов и оптимизация соотношения антитела к лизату для снижения фонового сигнала.
• Результаты ELISA могут зависеть от условий сорбции; протестируйте как прямой, так и сэндвич-формат ELISA.

CamelBio: ваш универсальный источник реагентов

CamelBio предоставляет производителям диагностических средств и исследовательским лабораториям комплексные решения по сырью для исследований некроптоза и гибели клеток. Мы предлагаем валидированные пары антител, рекомбинантные белки и вспомогательные реагенты для разработки аналитических методов. Для востребованных мишеней, таких как MLKL, наша сеть поставок обеспечивает наличие продукции большими партиями и стабильное качество, сокращая сроки разработки.