Фосфо-специфичное кроличье моноклональное антитело к IRAK4 (фосфо-Ser346) для ВБ, ИФА — Q9NWZ3

Основные технические характеристики и параметры продукта

Биологические особенности: функция и локализация IRAK4

• IRAK4 (киназа 4, ассоциированная с рецептором интерлейкина-1), также известный как антиген почечно-клеточной карциномы NY-REN-64, кодируется геном IRAK4. В результате альтернативного сплайсинга образуется несколько его изоформ.
• IRAK4 представляет собой серин/треонинкиназу, необходимую для запуска врожденных иммунных ответов против патогенов. Он функционирует ниже по пути от толл-подобных рецепторов (TLR) и IL-1R, быстро рекрутируясь в комплекс миддосом через адаптерный белок MYD88. Связанные публикации: PMID:17878374
• После активации IRAK4 фосфорилирует IRAK1, стимулируя его киназную активность и аутофосфорилирование. Он также фосфорилирует E3-убиквитин лигазы семейства Пеллино (PELI1, PELI2, PELI3), что способствует K63-связанной полиубиквитинизации IRAK1, приводящей к активации комплексов TAK1 и IKK и транслокации NF-κB в ядро.
• IRAK4 также фосфорилирует TIRAP, способствуя его убиквитинизации и деградации, а при стимуляции ЛПС фосфорилирует NCF1 для регуляции активности НАДФН-оксидазы, что вносит вклад в антимикробные ответы организма.
• Преимущественно локализован в цитоплазме.
• IRAK4 подвергается фосфорилированию и ацетилированию — эти модификации критически важны для его активации и выполнения функций.
• Мутации в гене IRAK4 ассоциированы с иммунодефицитными заболеваниями (например, IPD1, IMD67) и почечно-клеточной карциномой (NY-REN-64), что подчеркивает его роль в иммунной защите и развитии онкологических заболеваний.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Поскольку данное антитело специфично к фосфорилированному остатку Ser346, при подготовке образцов для вестерн-блоттинга необходимо добавлять ингибиторы фосфатаз для сохранения фосфорилирования.
• Иммуногеном для данного антитела является синтетический фосфопептид; рекомендуется использовать нефосфорилированный вариант этого пептида в качестве негативного контроля для подтверждения фосфорилирование-зависимого связывания.
• Для вестерн-блоттинга предсказанная молекулярная масса детектируемого белка составляет примерно 52 кДа. Убедитесь в достаточной загрузке белка и используйте подходящие позитивные контролы, например, стимулированные иммунные клетки.
• При работе в формате ИФА разработайте фосфо-специфичный протокол детекции; использование данного антитела в паре с антителом к общему IRAK4 позволяет проводить риометрический анализ уровня фосфорилирования.
• Поскольку перекрестная реактивность с белками других видов не была подтверждена, проводите валидацию антитела в вашей системе эксперимента с человеческими образцами.
• Оптимизируйте разведение антитела и условия инкубации под вашу конкретную экспериментальную установку.

CamelBio: ваш универсальный партнер по закупкам реагентов

CamelBio является универсальным партнером по закупкам сырья для производства диагностических систем in vitro, мы предлагаем валидированные антитела, подобранные пары и реагенты в больших объемах для производителей диагностических тест-систем и научно-исследовательских лабораторий. Для мишеней сигнальных путей врожденного иммунитета и киназ, таких как фосфо-IRAK4, мы предоставляем оптимизированные моноклональные антитела, вспомогательные реагенты и поиск сырья для редких мишеней, чтобы упростить разработку и производство тест-систем. Наши возможности снабжения покрывают все этапы проекта — от идеи до клинических исследований, гарантируя надежные и качественные материалы для ваших ответственных задач.