Фосфо-IκBα-S36 Кроличье моноклональное антитело для Вестерн-блоттинга, ИГХ-П, ИФА - P25963

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация IκBα

• IκBα (ингибитор NF-kappa-B альфа, также известный как MAD3 или NFKBI) — ключевой регуляторный белок, который ингибирует транскрипционные факторы NF-κB, удерживая димеры RELA/p65 и NFKB1/p50 в цитоплазме, маскируя их сигналы ядерной локализации. Связанные ссылки: PMID:1493333 PMID:36651806 PMID:7479976

• При клеточной стимуляции иммунными и провоспалительными сигналами IκBα подвергается фосфорилированию по Ser32 и Ser36, что запускает его убиквитинирование и последующую деградацию протеасомой, высвобождая димеры NF-κB для транслокации в ядро и активации транскрипции. Связанные ссылки: PMID:7479976 PMID:7628694 PMID:7796813

• IκBα является членом семейства ингибиторов IκB, характеризующихся анкириновыми повторами, которые опосредуют белок-белковые взаимодействия с димерами NF-κB.

• На субклеточном уровне IκBα перемещается между цитоплазмой и ядром, но его преобладающая локализация — цитоплазматическая, где он секвестрирует неактивные комплексы NF-κB.

• Посттрансляционные модификации IκBα включают фосфорилирование, убиквитинирование (конъюгация с Ubl), гидроксилирование и образование изопептидных связей, которые регулируют его стабильность и активность.

• Ген NFKBIA ассоциирован с эктодермальной дисплазией и другими иммуноопосредованными нарушениями при мутациях, что подчеркивает его критическую роль в иммунном гомеостазе.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуногеном является синтетический фосфорилированный пептид вокруг Ser36, что обеспечивает высокую специфичность к фосфорилированной форме. Для подтверждения фосфоспецифичности в Вестерн-блоттинге может использоваться блокирование нефосфорилированным пептидом.
• Для Вестерн-блоттинга рассмотрите стимуляцию клеток (например, TNF-α или IL-1β) для индукции фосфорилирования и деградации IκBα, что можно отслеживать с помощью этого антитела.
• В ИГХ-П следует оптимизировать протоколы демаскировки антигена и пермеабилизации; валидируйте окрашивание на срезах тканей с известной экспрессией активированного сигнального пути NF-κB.
• Для ИФА используйте это антитело в качестве улавливающего или детектирующего реагента; перекрестную реактивность с нефосфорилированным IκBα следует оценивать в зависимости от формата анализа.
• Поскольку антитело реагирует с человеческим, мышиным и крысиным белком, оно подходит для трансляционных исследований на этих видах; всегда включайте соответствующие положительные и отрицательные контроли.

CamelBio: Ваш универсальный мост для поставок

CamelBio служит вашим интегрированным партнером по поставкам сырья для ИВД, предлагая готовые к отгрузке моноклональные антитела, оптимизированные пары антител и вспомогательные реагенты для исследований пути NF-κB и разработки диагностики. Для этого антитела Phospho-IκBα-S36 и связанных сигнальных мишеней мы также можем поставлять большие объемы, редкие специфичности и пользовательские форматы, чтобы оптимизировать ваш рабочий процесс от концепции до клиники.