Фосфо-специфичные поликлональные антитела кролика против ERK1-T202 + ERK2-T185 для Вестерн-блоттинга, ИГХ-П, ИФ/ИЦХ, ИФА - P28482 / P27361

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация ERK1/ERK2

• ERK2 (MAPK1, также известный как p42-MAPK) и ERK1 (MAPK3, p44-MAPK) — две основные митоген-активируемые протеинкиназы, составляющие ядро сигнального каскада MAPK/ERK, которые передают внеклеточные сигналы для регуляции клеточной судьбы.
• Путь MAPK/ERK контролирует широкий спектр клеточных процессов, включая пролиферацию, дифференцировку, адгезию, выживание и апоптоз, путем фосфорилирования более 160 нижестоящих субстратов, таких как факторы транскрипции (например, ELK1, FOS, ATF2), протеинкиназы (например, RSK, MSK, MNK) и регуляторы цитоскелета.
• При активации ERK1/2 фосфорилирует GLI1, способствуя его диссоциации от SUFU и транслокации в ядро, тем самым положительно модулируя сигнализацию через смузед.
  Связанные ссылки: PMID:35831023
• В ответ на гипоксию ERK2 фосфорилирует фосфоглицераткиназу PGK1, направляя ее в митохондрию для подавления продукции ацетил-КоА из пирувата.
  Связанные ссылки: PMID:26942675
• Киназа локализуется в нескольких внутриклеточных компартментах: цитоплазме, ядре, цитоскелете (веретено деления, центросома), фокальных адгезиях и мембранных кавеолах, что обеспечивает контекст-зависимую передачу сигнала.
• Активация требует двойного фосфорилирования в мотиве Thr-Glu-Tyr (T185 и Y187 в ERK2; T202 и Y204 в ERK1) вышестоящими киназами MEK; данное антитело специфично детектирует фосфорилированные T185 (ERK2) и T202 (ERK1).
• Помимо киназной активности, ERK2 также функционирует как репрессор транскрипции, связываясь с GC-богатыми промоторными элементами независимо от своей каталитической активности, и модулирует интерферон-чувствительные гены.
• Ключевые слова: Ацетилирование, Альтернативный сплайсинг, Апоптоз, Связывание АТФ, Клеточный цикл, Клеточное соединение, Цитоплазма, Цитоскелет, Связывание ДНК, Взаимодействие хозяин-вирус, Киназа, Мембрана, Связывание нуклеотидов, Ядро, Фосфопротеин, Репрессор, Серин/треонин-протеинкиназа, Транскрипция, Регуляция транскрипции, Ubl-конъюгация.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Для сохранения фосфорилирования во время подготовки образцов включайте ингибиторы фосфатаз в лизирующие буферы и избегайте длительной обработки образцов при комнатной температуре.
• Проверяйте специфичность антитела, обрабатывая клеточные лизаты лямбда-протеинфосфатазой; ожидайте полной потери сигнала при Вестерн-блоттинге.
• При ИГХ1-П оптимизируйте условия демаскировки антигена (например, цитратный буфер pH 6.0) и рассмотрите возможность использования протокола фосфо-специфичной амплификации сигнала для улучшения детекции низкоэкспрессируемых фосфорилированных мишеней.
• Для ИФ/ИЦХ фиксируйте клетки формальдегидом и пермеабилизируйте метанолом; подтверждайте колокализацию с известными маркерами субклеточных структур (например, ядерный DAPI, маркеры аппарата Гольджи) в соответствии с ожидаемой локализацией после стимуляции.
• Ожидаемые полосы: ~38–43 кДа для изоформ ERK1/ERK2; возможно появление нескольких полос из-за различных состояний фосфорилирования или сплайс-вариантов.

CamelBio: Ваш мост к единому источнику поставок

CamelBio предоставляет производителям диагностических систем и исследовательским лабораториям надежный доступ к высококачественным исходным материалам для ИВД, включая эти фосфо-специфичные антитела к ERK1/ERK2. Наш портфель включает валидированные пары антител, рекомбинантные антигены и вспомогательные реагенты для поддержки разработки тест-систем, связанных с сигнализацией MAPK. Благодаря единому источнику поставок и консультационной технической поддержке CamelBio помогает вам переводить фундаментальные исследования в надежные диагностические решения.