Фосфо-eIF4EBP1-T45 кроличья pAb для Вестерн-блоттинга - Q13541

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический фон: Функция и локализация eIF4EBP1

• Белок 1, связывающий фактор инициации трансляции эукариот 4E (eIF4EBP1, также известный как PHAS-I), является ключевым репрессором кэп-зависимой инициации трансляции. Он принадлежит к семейству белков, связывающих eIF4E, и конкурирует с eIF4G за связывание с eIF4E, тем самым предотвращая сборку комплекса eIF4F.
• Репрессорная активность eIF4EBP1 регулируется его статусом фосфорилирования: гипофосфорилированный eIF4EBP1 сильно связывается с eIF4E и ингибирует трансляцию, в то время как гиперфосфорилирование (например, на Thr45 и других участках) отсоединяет его от eIF4E, позволяя формирование eIF4F и инициацию трансляции.
• eIF4EBP1 опосредует регуляцию синтеза белка ниже по течению от различных стимулов, включая гормоны, факторы роста и питательные вещества, через сигнальные пути MAP-киназы и mTORC1. Фосфорилирование по Thr45 является критическим ранним событием в каскаде последовательного многосайтового фосфорилирования.
• Субклеточная локализация преимущественно цитоплазматическая, но eIF4EBP1 также может перемещаться в ядро, где он может выполнять дополнительные регуляторные роли.
• Посттрансляционные модификации включают ацетилирование, убиквитинирование (образование изопептидной связи) и обширное фосфорилирование по множественным остаткам. Рассчитанный молекулярный вес немодифицированного белка составляет примерно 12,5 кДа, а миграция в SDS-PAGE часто наблюдается в районе 13–15 кДа в зависимости от состояния фосфорилирования.
• eIF4EBP1 широко экспрессируется и играет центральную роль в контроле роста, пролиферации и выживания клеток. Нарушение регуляции его фосфорилирования связано с раком и метаболическими нарушениями.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Используемый иммуноген представляет собой синтетический фосфо-пептид, охватывающий Thr45, что указывает на то, что эти антитела предназначены для специфического распознавания фосфорилированной формы Thr45 eIF4EBP1. Перекрестная реактивность с нефосфорилированным eIF4EBP1 или другими членами семьи маловероятна, но должна быть оценена в соответствующих модельных системах.
• Для вестерн-блоттинга убедитесь, что лизаты белков приготовлены в присутствии ингибиторов фосфатаз для сохранения состояния фосфорилирования. Ожидается полоса примерно при 13–15 кДа для человеческого eIF4EBP1; кажущийся молекулярный вес может незначительно смещаться в зависимости от общего уровня фосфорилирования.
• Включите соответствующие контроли для проверки специфичности антител, такие как необработанные лизаты по сравнению с лизатами, обработанными фосфатазой, или лизаты из клеток с модулированной активностью mTORC1 (например, голодание сывороткой / стимуляция инсулином).
• Эффективность антител в других приложениях (например, IHC, IF, IP) не описана; рекомендуется предварительное тестирование при использовании вне WB.

CamelBio: Ваш комплексный мост для закупок

CamelBio специализируется на оснащении производителей диагностических средств и исследовательских учреждений комплексным портфелем реагентов для IVD. Эти анти-фосфо-eIF4EBP1 антитела поддерживают исследования в области контроля трансляции и сигнального пути mTOR, критически важные для диагностики онкологических и метаболических заболеваний. Как ваш интегрированный партнер по закупкам, CamelBio предлагает валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные/поликлональные антитела, вспомогательные реагенты в больших объемах и гибкий доступ к реагентам для редких мишеней — оптимизируя ваш рабочий процесс от концепции до клиники.