Фосфо-eIF4EBP1-T37/T46 кроличья мАт для Вестерн-блоттинга и ИФА - Q13541

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическое предыстория: функция и локализация eIF4EBP1

• eIF4EBP1 (Эукариотический фактор инициации трансляции 4E-связывающий белок 1), также известный как PHAS-I, является ключевым репрессором инициации трансляции.
• Он регулирует активность EIF4E, конкурируя с EIF4G1/EIF4G3 за связывание с EIF4E. В гипофосфорилированном состоянии он прочно связывается с EIF4E и ингибирует кэп-зависимую трансляцию. Гиперфосфорилирование в ответ на сигналы роста вызывает диссоциацию от EIF4E, позволяя сборке комплекса eIF4F и инициации трансляции.
• Функционирует как нижестоящий эффектор путей mTORC1 и MAP-киназы, опосредуя синтез белка в ответ на гормоны, факторы роста и питательные вещества.
• Локализуется как в цитоплазме, так и в ядре, что соответствует его роли в модуляции трансляции и, возможно, ядерных функциях.
• Подвергается обширным посттрансляционным модификациям, включая фосфорилирование (например, по T37, T46, T70, S65), ацетилирование и убиквитинирование (отмечается как изопептидная связь и конъюгация Ubl), которые совместно регулируют его активность и стабильность.
• Молекулярная масса составляет приблизительно 13 кДа (12580 Да) согласно данным секвенирования, хотя миграция в SDS-PAGE может варьироваться в зависимости от состояния фосфорилирования.
• Классифицируется как ингибитор синтеза белка, фосфопротеин и принадлежит к семейству регуляции трансляции; также идентифицирован в протеомных исследованиях как компонент референсного протеома.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Это антитело распознает эндогенный уровень eIF4EBP1 только при фосфорилировании по остаткам Thr37 и Thr46.
• Для Вестерн-блоттинга включайте ингибиторы фосфатаз в лизирующие буферы для сохранения сигнала фосфорилирования. Основная полоса обычно мигрирует в районе 13-20 кДа; может появляться несколько полос из-за дифференциального фосфорилирования.
• Валидируйте фосфоспецифический сигнал, обрабатывая клетки стимулами (например, инсулином, сывороткой) для индукции фосфорилирования, и при необходимости используйте обработку фосфатазой или конкуренцию с нефосфорилированным пептидом.
• Для ИФА оптимизируйте условия покрытия и концентрацию антитела; рассмотрите возможность парирования с общим антителом к eIF4EBP1 для нормализации.
• Перекрестная реактивность была продемонстрирована для человека и крысы; для мыши, несмотря на гомологию последовательностей, реактивность не указана в данных по перекрестной реактивности; для образцов мыши может потребоваться валидация.

CamelBio: Ваш мост для комплексных закупок

CamelBio предоставляет производителям диагностических средств, лабораториям и исследовательским институтам комплексный портфель сырья для IVD, технических услуг и консалтинга. Это антифосфо-eIF4EBP1 (T37/T46) антитело иллюстрирует нашу приверженность поставке валидированных фосфоспецифических реагентов для обнаружения в исследованиях пути mTOR — поддерживаемую нашей возможностью поставлять оптимизированные моноклональные антитела, рекомбинантные белки и вспомогательные реагенты для разработки анализов. Вам нужны большие объемы или индивидуальные решения — CamelBio соединяет концепцию с клиникой.