Кроличий поликлональный антитело к фосфо-EGFR-Y869 для Вестерн-блоттинга и ИФА - P00533

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический фон: Функция и локализация EGFR

• EGFR — это рецепторная тирозинкиназа, которая связывает лиганды семейства EGF (включая EGF, TGF-альфа, AREG, эпиген, бета-клетулин, эпирегулин и HBEGF), что приводит к димеризации рецептора и аутофосфорилированию. Связанные ссылки: PMID:10805725 PMID:27153536 PMID:2790960 PMID:12297049 PMID:15611079 PMID:17909029

• Активированный лигандом EGFR запускает множественные внутриклеточные сигнальные каскады, включая модули RAS-RAF-MEK-ERK, PI3-киназа-AKT, PLCgamma-PKC и STAT, а также сигналинг NF-kappa-B. Связанные ссылки: PMID:27153536 PMID:11116146

• EGFR напрямую фосфорилирует другие белки, такие как RGS16 (усиливая его ГТФазную активность) и MUC1 (способствуя его взаимодействию с SRC и бета-катенином), связывая их с путями G-белков и клеточной адгезии. Связанные ссылки: PMID:11602604 PMID:11483589

• EGFR положительно регулирует миграцию клеток, взаимодействуя с CCDC88A/GIV, который удерживает EGFR на клеточной мембране и поддерживает сигналинг. Связанные ссылки: PMID:20462955

• Ген EGFR (также известный как ERBB1, HER1) кодирует рецепторную тирозинкиназу, принадлежащую к семейству ERBB; альтернативно сплайсированный изоформ (изоформа 2) может действовать как антагонист действия EGF и экспрессируется при раке яичников.

• EGFR преимущественно локализуется на клеточной мембране, но также обнаруживается в эндоплазматическом ретикулуме, аппарате Гольджи, ядерной мембране, эндосомах и может секретироваться.

• EGFR — это фосфопротеин с ключевыми сайтами тирозиновой фосфорилирования (включая Y869), регулирующими его киназную активность, и подвергается гликозилированию, убиквитинированию и другим посттрансляционным модификациям.

• Универсально экспрессируется в тканях человека; EGFR выступает в качестве клеточного рецептора хозяина для вируса гепатита C (HCV), способствуя проникновению вируса в гепатоциты.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген представляет собой синтетический фосфопептид, соответствующий остаткам в районе Y869 человеческого EGFR. Для подтверждения специфичности к фосфогруппе включите обработанные фосфатазой контроли или проведите конкуренцию с нефосфорилированным пептидом.
• Для вестерн-блоттинга используйте лизаты клеток, стимулированные EGF, и ожидайте полосу на уровне ~134 кДа; сообщается о перекрестной реактивности с EGFR мыши и крысы, но проведите валидацию для интересующего вас вида.
• Для ИФА рассмотрите возможность покрытия фосфорилированным пептидом и оптимизацию условий блокировки и детекции для улучшения соотношения сигнал/шум.
• Избегайте жестких условий смывания (stripping) при повторном зондировании блотов, так как это может удалить специфический фосфорилированный сигнал.

CamelBio: Ваш мост для комплексного снабжения

CamelBio предлагает широкий ассортимент сырья для IVD, включая валидированные специфичные к фосфогруппе антитела, рекомбинантные белки и вспомогательные реагенты. Для исследований сигналинга EGFR и разработки диагностических тестов мы предоставляем надежные высококачественные антитела и можем поддержать поиск редких или индивидуальных мишеней. От первоначальной концепции до клинического применения CamelBio оптимизирует вашу цепочку поставок как надежный партнер.