Фосфо-Chk1-S317 кроличья поликлональная антитело (WB, ELISA) - O14757

Основные технические характеристики и параметры продукта

Биологическая характеристика: функция и локализация Chk1

• Серин/треонин-протеинкиназа Chk1 (CHEK1) — ключевая киназа контрольной точки клеточного цикла, которая обеспечивает целостность генома, опосредуя остановку клеточного цикла и репарацию ДНК при повреждении ДНК или стрессе репликации. Связанные источники: PMID:11535615, PMID:12399544, PMID:12446774
• Chk1 фосфорилирует CDC25A, CDC25B и CDC25C, что приводит к их ингибированию за счет связывания с 14-3-3 или протеасомной деградации, предотвращая активацию CDK-циклина и блокируя прогрессию клеточного цикла. Связанные источники: PMID:12676583, PMID:12676925, PMID:12759351, PMID:9278511, PMID:19734889, PMID:20090422
• Chk1 напрямую фосфорилирует RAD51 по треонину-309 для стимулирования гомологичной рекомбинационной репарации, TP53 по нескольким С-концевым сайтам для усиления его активации и остановки клеточного цикла, а также FANCE для облегчения репарации сшитых соединений ДНК. Связанные источники: PMID:15665856, PMID:10673501, PMID:15659650, PMID:16511572, PMID:17296736
• Chk1 фосфорилирует TLK1 по серину-743, предотвращая фосфорилирование ASF1A и усиливая сборку хроматина, а также регулирует PCNA для поддержания стабильности вилок репликации. Связанные источники: PMID:12660173, PMID:12955071, PMID:18451105
• Кроме того, Chk1 фосфорилирует гистон H3.1 (H3T11ph) для эпигенетического сайленсинга генов, фосфорилирует RB1 для стимулирования взаимодействия с E2F, а также нацеливается на SPRTN и PABIR1/FAM122A для модуляции стресса репликации и контрольной точки G2/M. Связанные источники: PMID:17380128, PMID:31316063, PMID:33108758
• Эндогенный сплайс-вариант действует как репрессор полноразмерного Chk1, антагонизируя его функцию и стимулируя переход из S фазы в G2/M.
• Субклеточная локализация: Chk1 обнаружен в ядре, на хромосомах, цитоплазме и центросомах, с обогащением на центросоме во время митоза.
• Экспрессируется повсеместно, самые высокие уровни наблюдаются в вилочковой железе, яичках, тонкой кишке и толстой кишке.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген представляет собой синтетический фосфопептид, соответствующий участку вокруг Ser317; при подготовке образцов обязательно используйте ингибиторы фосфатаз для сохранения эндогенного фосфорилирования этого сайта.
• При вестерн-блоттинге ожидается получение специфической полосы с молекулярной массой ~54 кДа. Для валидации специфичности обработайте лизаты клеток лямбда-фосфатазой или используйте нефосфо-специфические антитела к Chk1 в качестве контроля.
• В ИФА используйте иммобилизованный пептид или лизаты клеток, рекомендуется блокировка фосфорилированными и нефосфорилированными пептидами для подтверждения фосфо-специфичности антитела.
• Оптимизируйте разведение антитела для вашей конкретной экспериментальной системы; типичные начальные разведения для WB составляют 1:500–1:2000, но рекомендуется эмпирическое определение оптимального разведения.
• Перекрестная реактивность подтверждена для образцов человека; для других видов необходимо проверить гомологию последовательности вокруг сайта Ser317 и провести экспериментальную проверку.

CamelBio: ваш универсальный мост по поиску реагентов

CamelBio предоставляет производителям диагностикумов, лабораториям и исследовательским институтам упрощенный доступ к широкому портфелю сырьевых материалов для ИВД, включая валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, а также вспомогательные реагенты в больших объемах. Для проектов, нацеленных на ответ на повреждение ДНК и регуляцию клеточного цикла, мы можем организовать поиск и поставку сырьевых материалов для редких мишеней, таких как фосфо-специфические антитела к Chk1 и родственным киназам контрольных точек. Независимо от того, нужен ли вам один реагент или полная заказная панель, CamelBio является вашим партнером на всех этапах от концепции до клинических исследований.