Кроличий моноклональный антитело к фосфо-CDK1-T161+CDK2/CDK3-T160 для Вестерн-блоттинга, ИП, ИФ - P06493

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическое обоснование: Функция и локализация CDK1

• Циклин-зависимая киназа 1 (CDK1, также известная как CDC2/p34) — это высококонсервативная серин/треониновая киназа, служащая главным регулятором эукариотического клеточного цикла, управляющая переходом G2-M и координирующая вход в митоз и его прохождение (PubMed:16407259, PubMed:16933150, PubMed:17459720). Связанные ссылки: PMID:16407259 PMID:16933150 PMID:17459720
• Активность CDK1 строго контролируется связыванием с циклинами и фосфорилированием: для активации требуется фосфорилирование T161 комплексом киназы, активирующей CDK (CAK) (CDK7/циклин H/MAT1), в то время как ингибирующее фосфорилирование по T14 и Y15 опосредуется киназами WEE1 и PKMYT1; дефосфорилирование фосфатазами CDC25 на границе G2-M запускает резкую активацию (PubMed:18480403, PubMed:20360007, PubMed:2188730). Связанные ссылки: PMID:18480403 PMID:20360007 PMID:2188730
• После активации CDK1 фосфорилирует более сотни нижестоящих субстратов для координации митотических событий, включая фосфорилирование ламинов, приводящее к распаду ядерной оболочки, фосфорилирование микротубул-ассоциированных белков для сборки веретена деления и фосфорилирование гистона H1 для конденсации хромосом (PubMed:2188730, PubMed:2344612, PubMed:37788673). Связанные ссылки: PMID:2188730 PMID:2344612 PMID:37788673
• На субклеточном уровне CDK1 динамически локализуется в ядре, цитоплазме, митохондриях, центросомах и веретене деления, что отражает ее разнообразные функциональные роли на протяжении клеточного цикла.
• CDK1 также регулирует факторы транскрипции (например, FOXO1), белки апоптоза (например, Bcl-xL, каспаза 8) и эпигенетические модификаторы (например, EZH2), связывая контроль клеточного цикла с принятием решений о судьбе клетки и ответами на повреждение ДНК (PubMed:18356527, PubMed:19917720, PubMed:20937773, PubMed:20935635). Связанные ссылки: PMID:18356527 PMID:19917720 PMID:20937773 PMID:20935635
• CDK1 необходима для раннего эмбрионального развития, и ее дисрегуляция часто наблюдается при раке, где она может быть сверхэкспрессирована или гиперактивирована, способствуя неконтролируемой пролиферации (PubMed:18480403, PubMed:20360007). Связанные ссылки: PMID:18480403 PMID:20360007
• Кроме того, CDK1 служит рецептором для проникновения вируса гепатита С (HCV) в гепатоциты, что указывает на роль, выходящую за рамки регуляции клеточного цикла.

Экспериментальное руководство и технические советы

• Иммуноген представляет собой синтетический фосфопептид, нацеленный на фосфорилированный T161 человеческого CDK1, консервативный остаток в активационной петле. Ожидается, что антитело будет распознавать активированную (фосфорилированную по T161) форму CDK1 и потенциально перекрестно реагировать с фосфорилированным T160 CDK2 и CDK3 из-за гомологии последовательностей.
• Для вестерн-блоттинга обрабатывайте лизаты клеток ингибиторами фосфатаз для сохранения статуса фосфорилирования. Предполагаемый молекулярный вес составляет ~34 кДа; контролируйте сдвиги полос или изменения интенсивности после обработки фосфатазой для подтверждения фосфоспецифичности.
• При иммунопреципитации предварительная очистка с контрольным IgG и использование условий лизиса без денатурации могут улучшить обнаружение комплексов CDK1.
• Для иммунофлуоресценции и иммуногистохимии методы пермеабилизации и фиксации должны быть оптимизированы; антитело может обнаруживать ядерное, цитоплазматическое и центросомальное окрашивание в зависимости от фазы клеточного цикла.
• Приложения точечного блоттинга и ИФА могут использоваться для высокопроизводительного скрининга уровней фосфо-CDK1 в образцах.

CamelBio: Ваш мост для комплексных закупок

CamelBio стремится предоставлять производителям диагностических средств, лабораториям и научно-исследовательским институтам комплексную поставку сырья для IVD, технических услуг и консультационной поддержки от концепции до клиники. Наш портфель включает валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, вспомогательные реактивы оптом и поиск редких мишеней на заказ. Это антифосфо-CDK1 антитело поддерживает исследования клеточного цикла и онкологии, а мы предлагаем гибкие решения для закупок, чтобы ускорить ваши процессы разработки и производства.