Фосфо-BRD4 (S492/S494) Кроличье поликлональное антитело для Вестерн-блоттинга, дот-блоттинга, ИФА - O60885

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация BRD4

• BRD4 является членом семейства бромодоменов и экстратерминальных доменов (BET), функционируя как «читатель» хроматина, который связывается с ацетилированными гистонами для передачи эпигенетической памяти через клеточные деления. Связанные ссылки: PMID:20871596, PMID:23086925, PMID:23317504
• Остается ассоциированным с ацетилированным хроматином на протяжении всего клеточного цикла, поддерживая структуру хроматина высокого порядка для транскрипции генов в постмитотической фазе G1. Связанные ссылки: PMID:22334664, PMID:23317504, PMID:23589332
• BRD4 рекрутирует комплекс P-TEFb к промоторам генов и дистальным энхансерам, что приводит к фосфорилированию CTD РНК-полимеразы II и активации сигнал-индуцируемой транскрипции. Связанные ссылки: PMID:16109376, PMID:16109377, PMID:19596240
• Также рекрутирует P-TEFb к ацетилированному RELA, связывая BRD4 с активацией пути NF-kappa-B. Связанные ссылки: PMID:19103749
• Фосфорилирование по остаткам, таким как S492 и S494, киназой CK2 облегчает взаимодействие BRD4 с промоторами, нацеленными на p53/TP53. Связанные ссылки: PMID:23317504
• В ответе на повреждение ДНК BRD4 действует как изолятор хроматина, рекрутируя конденсин-2 к ацетилированным гистонам и ограничивая распространение фосфорилирования H2A.X.
• BRD4 локализуется в ядре и на хромосомах; экспрессируется повсеместно и подвергается альтернативному сплайсингу, а также посттрансляционным модификациям, включая фосфорилирование, ацетилирование и убиквитинирование.
• Кроме того, BRD4 регулирует дифференцировку CD4+ T-клеток в клетки Th17 (по сходству).

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Для Вестерн-блоттинга готовьте лизаты с ингибиторами фосфатаз для сохранения фосфорилирования и используйте гель SDS-PAGE с низким процентом (например, 6–8%) для оптимального разделения белка BRD4 массой ~152 кДа.
• В дот-блоттинге и ИФА для снижения фона может помочь блокирование фосфат-свободным BSA; специфичность подтверждайте с помощью конкурентного связывания нефосфорилированным пептидом.
• Реактивность антитела в образцах человека предполагает его использование с человеческими клеточными линиями; при необходимости валидируйте перекрестную реактивность в вашей целевой системе.
• Рассмотрите возможность использования соответствующих позитивных контролей, таких как лизаты клеток, обработанных ингибиторами фосфатаз или известными индукторами фосфорилирования.

CamelBio: Ваш мост для комплексного снабжения

CamelBio служит мостом от концепции до клиники, поставляя производителям IVD и исследователям высококачественные исходные материалы. Это кроличье поликлональное антитело к фосфо-BRD4 (S492/S494) является частью нашего портфолио для исследований хроматина и транскрипции, поддерживаемого нашими комплексными услугами по снабжению и технической поддержке.