Фосфо-AMPKα1-S496 Кроличье моноклональное антитело для Вестерн-блоттинга, ИФА - Q13131

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация AMPKα1

• AMPKα1, кодируемый геном PRKAA1, является каталитической альфа-1 субъединицей гетеротримерной АМФ-активируемой протеинкиназы (AMPK) — центрального клеточного сенсора энергии.
• В ответ на низкий внутриклеточный уровень АТФ AMPKα1 фосфорилирует ключевые метаболические ферменты и факторы транскрипции, чтобы ингибировать анаболические процессы (синтез липидов, белков, углеводов) и стимулировать катаболические пути, тем самым восстанавливая энергетический гомеостаз. Связанные ссылки: PMID:17307971, PMID:17712357, PMID:24563466
• AMPKα1 напрямую регулирует липидный обмен, фосфорилируя и инактивируя ацетил-КоА карбоксилазы (ACACA и ACACB), ГМГ-КоА редуктазу (HMGCR) и гормон-чувствительную липазу (LIPE), тем самым контролируя синтез жирных кислот и холестерина.
• Он также играет критическую роль в поддержании гомеостаза глюкозы, фосфорилируя CRTC2/TORC2 (что приводит к его секвестрации в цитоплазме) и способствуя транслокации GLUT4 к плазматической мембране.
• Помимо метаболизма, AMPKα1 подавляет рост и пролиферацию клеток, ингибируя путь mTORC1 через фосфорилирование TSC2, RPTOR и WDR24, а также активирует аутофагию посредством фосфорилирования ULK1 и WDR45/WIPI4. Связанные ссылки: PMID:14651849, PMID:18439900, PMID:20160076, PMID:21205641, PMID:28561066, PMID:36732624, PMID:37079666
• Субклеточная локализация включает цитоплазму, ядро и поздние эндосомы, что согласуется с его ролями в метаболической регуляции, транскрипции генов и эндосомальной передаче сигналов.
• AMPKα1 является фосфопротеином, регуляция которого осуществляется через фосфорилирование по различным остаткам; фосфорилирование по Ser496 идентифицировано и может влиять на его киназную активность или локализацию.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Всегда включайте ингибиторы фосфатаз в состав лизирующего буфера и при подготовке образцов для сохранения фосфо-эпитопа.
• Проверяйте специфичность, обрабатывая образцы лямбда протеинфосфатазой или проводя конкуренцию с иммунизирующим фосфо-пептидом; исчезновение сигнала подтверждает фосфо-специфичность.
• При Вестерн-блоттинге ожидайте полосу примерно на 64 кДа в клеточных линиях человека или мыши; активация AMPK с помощью AICAR, метформина или депривации глюкозы может усилить детекцию.
• В ИФА рассмотрите возможность использования этого антитела в комбинации с пан-AMPKα захватывающим антителом для количественного определения уровня фосфо-AMPKα1 (S496).

CamelBio: Ваш единый источник поставок

CamelBio предоставляет производителям диагностических систем и исследователям упрощенный доступ к высококачественным сырьевым материалам для ИФА, от валидированных антител до вспомогательных реагентов в больших объемах. Для исследований сигнального пути AMPK и метаболических заболеваний мы предлагаем комплексные решения по поставкам, включая оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, подобранные пары антител, а также поддержку в разработке реагентов для редких мишеней. Сотрудничайте с CamelBio, чтобы ускорить разработку ваших аналитических систем от концепции до клиники.