Фосфо-AKT1S1/PRAS40-T246 кроличья pAb для Вестерн-блоттинга, ИФА - Q96B36

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическое предыстория: Функция и локализация AKT1S1/PRAS40

• AKT1S1 (также известный как PRAS40, богатый пролином субстрат AKT массой 40 кДа) является отрицательным регулятором мишени рапамицина комплекса 1 (mTORC1), эволюционно консервативного центрального сенсора питательных веществ, который стимулирует анаболические реакции и биосинтез макромолекул для увеличения биомассы и роста клетки. Связанные ссылки: PMID:17277771 | PMID:17386266 | PMID:17510057
• В отсутствие инсулина и питательных веществ AKT1S1 связывается с комплексом mTORC1 и напрямую ингибирует активность mTORC1, блокируя сайт рекрутирования субстрата MTOR. Связанные ссылки: PMID:29236692
• В ответ на инсулин и питательные вещества AKT1S1 диссоциирует от mTORC1; этот процесс зависит от его состояния фосфорилирования и связывания с белками 14-3-3. Связанные ссылки: PMID:17386266 | PMID:18372248 | PMID:16174443
• Фосфорилирование по Thr246 (сайт иммуногена) способствует связыванию с 14-3-3 и снимает ингибирование mTORC1.
• AKT1S1 локализуется преимущественно в цитоплазме и цитозоле.
• Широко экспрессируется с наивысшим уровнем в печени и сердце; экспрессия повышена в некоторых линиях раковых клеток (например, A-549, HeLa) по сравнению с нормальными клетками (например, HEK293).
• Может также играть роль в нейропротекции, опосредованной фактором роста нервов (По сходству).
• Классифицируется как фосфопротеин с расчетной молекулярной массой около 27 кДа (UniProt: 27383 Да); подвергается альтернативному сплайсингу.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Это антитело специфично обнаруживает фосфорилированную форму AKT1S1 по Thr246; оно не распознает нефосфорилированный белок. Включайте лизаты, обработанные фосфатазой, в качестве отрицательного контроля для подтверждения зависимости сигнала от фосфорилирования.
• Для Вестерн-блоттинга ожидайте полосу около 27 кДа. Используйте ингибиторы фосфатаз в буферах для лизиса для сохранения состояния фосфорилирования.
• В применениях ИФА рассмотрите возможность коатинга (сенсибилизации) фосфо-пептидным иммуногеном и проверьте специфичность по отношению к соответствующему нефосфорилированному пептиду.
• При изучении сигнального пути mTORC1 стимулируйте клетки инсулином или факторами роста для индуцирования фосфорилирования AKT1S1 и мониторинга диссоциации от комплекса mTORC1.
• Проверьте антитело в вашей экспериментальной системе; линии раковых клеток человека (например, HeLa, A-549) могут демонстрировать более высокую эндогенную экспрессию, что облегчает обнаружение.

CamelBio: Ваш комплексный мост для закупок

CamelBio — это ваш комплексный мост для закупок сырья для IVD, предлагающий широкий портфель валидированных пар антител, высококачественных моноклональных и поликлональных антител, а также вспомогательных реагентов оптом. Для исследований сигнального пути mTORC1 и метаболических заболеваний мы можем поддержать вашу разработку оптимизированными фосфо-специфичными антителами, такими как это антитело к AKT1S1/PRAS40‑T246, и индивидуальными решениями поставок. Свяжитесь с нами, чтобы обсудить, как мы можем ускорить создание ваших диагностических тестов от концепции до клиники.