Фосфо-специфичное кроличье моноклональное антитело к AKT1-T450 + AKT2-T451 + AKT3-T447 для Вестерн-блоттинга, ИГХ-П, ИФА - P31749 / P31751 / Q9Y243

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация семейства AKT

• Семейство AKT включает три близкородственные серин/треонин-протеинкиназы: AKT1 (PKB альфа, P31749), AKT2 (PKB бета, P31751) и AKT3 (PKB гамма, Q9Y243), кодируемые генами AKT1, AKT2 и AKT3 соответственно. Они обладают высокой гомологией последовательностей и перекрывающимися, но различными биологическими ролями.
• Киназы AKT регулируют разнообразные клеточные процессы, включая метаболизм, пролиферацию, выживание клеток, рост и ангиогенез, путем фосфорилирования широкого спектра нижестоящих субстратов (сообщается о более чем 100).
  Связанные ссылки: PMID:11882383, PMID:15526160, PMID:15861136
• После активации факторами роста и сигнальным путем PI3K, AKT опосредует индуцированный инсулином захват глюкозы через транслокацию SLC2A4/GLUT4, способствует синтезу гликогена, ингибируя GSK3, и стимулирует синтез белка через активацию пути mTORC1.
  Связанные ссылки: PMID:11994271, PMID:12150915, PMID:12172553
• AKT способствует выживанию клеток, фосфорилируя и инактивируя проапоптотические факторы, такие как MAP3K5/ASK1 и BAD, а также активируя транскрипционные факторы, подобные CREB1, которые запускают экспрессию антиапоптотических генов.
  Связанные ссылки: PMID:11154276, PMID:9829964, PMID:10926925
• Субклеточная локализация включает цитоплазму, ядро, клеточную мембрану и межмембранное пространство митохондрий, что отражает его широкую сигнальную роль в компартментализованных клеточных ответах.
• Посттрансляционные модификации, особенно фосфорилирование, критически важны для активности AKT; два ключевых остатка (Thr-308 и Ser-473 в AKT1) необходимы для полной активации, в то время как фосфорилирование в turn-мотиве (Thr-450 в AKT1, эквивалентно Thr-451 в AKT2 и Thr-447 в AKT3) может влиять на стабильность киназы и белок-белковые взаимодействия.
• AKT1 экспрессируется повсеместно, а изменения в его экспрессии и фосфорилировании связаны с патологическими состояниями, включая рак; повышенные уровни фосфо-AKT часто наблюдаются при раке молочной железы и простаты.
• Ключевые слова, связанные с AKT1 (UniProt P31749), включают апоптоз, метаболизм углеводов, клеточная мембрана, цитоплазма, киназа, ядро, фосфопротеин, протоонкоген, серин/треонин-протеинкиназа и регуляция трансляции.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуногеном является синтетический фосфорилированный пептид, охватывающий область Thr-450 человеческого AKT1; ожидается, что антитело будет распознавать AKT1, AKT2 и AKT3 при фосфорилировании по соответствующим эквивалентным сайтам (T450/T451/T447).
• Для Вестерн-блоттинга готовьте лизаты с ингибиторами фосфатаз для сохранения фосфорилирования; ожидаемые полосы около 48–55 кДа в зависимости от изоформы. Включайте соответствующие положительные контроли (например, клетки, стимулированные фактором роста) и отрицательные контроли (необработанные или обработанные фосфатазой образцы).
• Рассмотрите возможность использования образцов, обработанных фосфатазой, или контроля с блокированием не-фосфо пептидом для подтверждения фосфо-специфичности сигнала.
• При иммуногистохимии (ИГХ-П) оптимизируйте условия демаскировки антигена и включайте положительные/отрицательные тканевые контроли для валидации окрашивания; фосфо-специфические сигналы могут быть чувствительны к фиксации и обработке.
• Для ИФА используйте соответствующие реагенты для захвата/детекции и валидируйте анализ с использованием известных концентраций фосфорилированного пептида или клеточных лизатов.

CamelBio: Ваш мост для комплексных поставок

CamelBio предоставляет производителям диагностических систем и исследовательским институтам комплексный доступ к валидированным сырьевым материалам для ИВД, включая это фосфо-AKT антитело для исследований сигнальной трансдукции. Как специализированный B2B-партнер, мы поставляем оптимизированные моноклональные/поликлональные антитела, вспомогательные реагенты оптом и поддерживаем поиск редких мишеней, чтобы ускорить разработку ваших аналитических систем от концепции до клиники.