Фосфо-AKT1-T308+AKT2-T309+AKT3-T305 Кроличий pAb - P31749 / P31751 / Q9Y243

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация AKT1 (RAC-альфа серин/треонин-протеинкиназа)

• AKT1 (PKBα, RAC-PK-альфа) — это повсеместно экспрессируемая серин/треонин киназа, которая вместе с AKT2 и AKT3 образует семейство киназ AKT, центральное для сигнализации PI3K, регулирующей метаболизм, пролиферацию, выживание, рост и ангиогенез. Связанные ссылки: PMID:11882383 PMID:15526160 PMID:15861136
• Путем фосфорилирования многочисленных субстратов AKT1 опосредует индуцированный инсулином захват глюкозы (TBC1D4) и синтез гликогена (GSK3A/GSK3B). Связанные ссылки: PMID:11994271
• Он способствует выживанию клеток, фосфорилируя MAP3K5/ASK1 по Ser-83, ингибируя апоптоз, и запускает сигнализацию mTORC1 через фосфорилирование TSC2 и DEPDC5. Связанные ссылки: PMID:11154276 PMID:12150915 PMID:12172553 PMID:31548394 PMID:33594058
• AKT1 регулирует транскрипционные факторы FOXO1/3/4 и CREB1, влияя на экспрессию про-выживающих генов и NF-κB-зависимую транскрипцию. Связанные ссылки: PMID:10358075 PMID:9829964
• На субклеточном уровне AKT1 перемещается между цитоплазмой, ядром, клеточной мембраной и митохондриями, где модулирует захват кальция митохондриями и другие органелло-специфичные функции.
• Ключевые активирующие фосфорилирования происходят по Thr-308 (или эквивалентным Thr-309 в AKT2, Thr-305 в AKT3) в активационной петле и Ser-473 в гидрофобном мотиве, запускаясь стимуляцией факторами роста.
• AKT1 часто дисрегулирован при раке (простаты, молочной железы) и действует как протоонкоген, причем повышенные уровни фосфорилирования коррелируют с прогрессированием заболевания.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Используйте ингибиторы фосфатаз во время подготовки образцов для сохранения фосфорилированного сигнала; валидируйте фосфоспецифичность, сравнивая с антителами к общему AKT или с помощью обработки фосфатазой.
• Иммуногеном является синтетический фосфопептид вокруг Thr-308 человеческого AKT1; ожидается, что антитело будет детектировать фосфорилированные AKT1, AKT2 и AKT3 в эквивалентных сайтах при тестировании на соответствующих видах.
• Для Вестерн-блоттинга ожидайте множественные полосы, соответствующие различным изоформам AKT (~48-55 кДа); подтвердите идентичность полос с помощью изоформ-специфичных контролей или siRNA при необходимости.
• Для ИФА рассмотрите использование парной комбинации фосфоспецифичных/общих антител к AKT для нормализации по количеству загруженного белка.
• Оптимизируйте разведение первичного антитела для вашего конкретного типа образца; рекомендуемые стартовые разведения для WB обычно составляют 1:500-1:2000, но должны определяться эмпирически.

CamelBio: Ваш мост для комплексных поставок

CamelBio предоставляет производителям диагностических систем и исследовательским лабораториям упрощенный доступ к комплексному портфолио сырья для ИВД, включая валидированные фосфоспецифичные антитела, такие как это кроличье pAb к фосфо-AKT1/2/3 (T308/T309/T305). Независимо от того, нужны ли вам оптовые количества моно- или поликлональных антител, подобранные пары антител или вспомогательные реагенты для анализа фосфо-сигнальных путей, наша модель комплексных поставок охватывает каждый шаг — от концепции до клинического применения. Для сложных мишеней в исследованиях киназной сигнализации или онкологии экспертная команда CamelBio может найти или разработать пользовательские сырьевые материалы в соответствии с вашими конкретными требованиями к анализу.