Кроличья моноклональная антитело к фосфо-AKT1-S124 для ВБ и ИФА - P31749

Основные технические характеристики и параметры продукта

Биологическая информация: функция и локализация AKT1

• AKT1 — это серин/треонинпротеинкиназа, принадлежащая к семейству AKT (AKT1, AKT2, AKT3), которая регулирует ключевые процессы, включая метаболизм, пролиферацию, выживание клеток, рост и ангиогенез (PubMed:11882383, PubMed:15526160, PubMed:15861136). Связанные источники: PMID:11882383 PMID:15526160 PMID:15861136
• Она передает сигнал ниже по пути от PI3K, опосредуя эффекты инсулина и факторов роста, способствуя поглощению глюкозы (SLC2A4/GLUT4), синтезу гликогена (через ингибирование GSK3) и синтезу белков (через активацию mTORC1) (PubMed:11994271, PubMed:12150915, PubMed:12172553). Связанные источники: PMID:11994271 PMID:12150915 PMID:12172553
• AKT1 регулирует выживание клеток путем фосфорилирования и ингибирования проапоптотических факторов: она снижает активность MAP3K5/ASK1 (PubMed:11154276), стимулирует BAD (PubMed:10926925) и активирует транскрипцию BCL2/MCL1 под контролем NF-kappa-B (PubMed:9829964). Связанные источники: PMID:11154276 PMID:10926925 PMID:9829964
• Фосфорилирование транскрипционных факторов FOXO (FOXO1, FOXO3, FOXO4) AKT1 приводит к связыванию с 14-3-3 и удержанию в цитоплазме, что ингибирует транскрипцию генов, вызывающих апоптоз и остановку клеточного цикла (PubMed:10358075). Связанные источники: PMID:10358075
• Локализуясь в цитоплазме, ядре, клеточной мембране и межмембранном пространстве митохондрий, AKT1 динамично транслоцируется в ответ на стимулы; в митохондриях он модулирует поглощение кальция и активность канала TMEM173 независимо от своей киназной функции (PubMed:32228865, PubMed:30504268).
• Экспрессируясь во всех тканях человека, AKT1 часто гиперактивирована при раковых заболеваниях; повышенный уровень фосфо-Tyr176 AKT1 коррелирует с прогрессией рака молочной железы от нормальной стадии до метастатической.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Для подтверждения фосфоспецифичности сравните сигналы лизатов, обработанных и не обработанных лямбда-фосфатазой, или проведите анализ конкурентного связывания пептидов с иммуногенным пептидом и его нефосфорилированным аналогом.
• При вестерн-блоттинге лизаты необходимо готовить с добавлением ингибиторов фосфатаз; ожидаемая молекулярная масса составляет приблизительно 56 кДа; рекомендуется использовать контроль загрузки образцов, например общее AKT1 или GAPDH.
• При проведении ИФА используйте синтетический фосфопептид в качестве стандарта для построения калибровочной кривой и полуколичественного анализа фосфорилированного AKT1-S124 в биологических образцах.
• Активация фосфорилирования AKT1 может быть проверена на клеточных линиях, стимулированных инсулином или факторами роста; для подтверждения зависимости от сигнального пути рекомендуется использовать ингибиторы PI3K (например, LY294002).

CamelBio: ваш универсальный партнер по поиску реагентов

CamelBio — специализированный поставщик сырья для производства ИВД-диагностики, предлагающий комплексные решения для разработки диагностических тестов. Данное кроличье моноклональное антитело к фосфо-AKT1-S124 подходит для исследования пути PI3K/AKT, имеющего отношение к онкологии и метаболическим заболеваниям. Помимо отдельных антител мы предоставляем валидированные антительные пары, вспомогательные реагенты большими объемами и поиск реагентов к редким мишеням, чтобы ускорить разработку ваших тест-систем от концепции до клинического применения.