Кроличье моноклональное антитело к PER2 (человек) для Вестерн-блоттинга, ИФА, ChIP - O15055

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация PER2

• PER2 (Period circadian protein homolog 2), также известный как циркадный часовой белок PERIOD 2, является ключевым компонентом молекулярных циркадных часов. Он функционирует как транскрипционный репрессор в рамках петли транскрипционно-трансляционной обратной связи (TTFL), которая обеспечивает примерно 24-часовые ритмы экспрессии генов.
• Вместе с PER1, CRY1 и CRY2, PER2 образует негативное звено TTFL. Он напрямую взаимодействует с гетеродимерами CLOCK-BMAL1 на E-box промоторах, ингибируя собственную экспрессию, в то время как посттрансляционные модификации (например, фосфорилирование, ацетилирование, убиквитинирование) тонко настраивают период (тау) циркадных ритмов.
• PER2 способствует репрессии, контролируемой часами, через несколько механизмов: он рекрутирует SIN3-HDAC хроматин-ремоделирующие комплексы и H3K9 метилтрансферазы (SUV39H1/2) к промоторам часовых генов, а также взаимодействует с РНК-связывающими белками и хеликазами на сайтах 3'-терминации, модулируя терминацию транскрипции.
• Белок вовлечен в метаболическую и сердечно-сосудистую регуляцию. Он действует как коактиватор PPARA и корепрессор NR1D1, ритмично связываясь с промоторами генов, таких как BMAL1 и G6PC1, и репрессирует PPARG-опосредованный адипогенез. PER2 также регулирует продукцию оксида азота и простагландинов в аорте и контролирует захват глутамата через экспрессию VGLUT1.
• Биаллельные мутации потери функции в гене PER2 вызывают семейный синдром продвинутой фазы сна (FASPS), подчеркивая его важнейшую роль в синхронизации циркадных часов с циклами свет-темнота окружающей среды.
• PER2 локализуется преимущественно в ядре, но также обнаруживается в цитоплазме, перинуклеарной области и ядрышке, что отражает динамическое перемещение и компартмент-специфичные функции.
• Белок широко экспрессируется, с высоким уровнем в скелетных мышцах и поджелудочной железе, и более низким уровнем в легких. Изоформа 2 специфично детектируется в кератиноцитах.
• Ключевые структурные особенности включают два PAS-домена и C-концевой цитоплазматический домен локализации, которые способствуют белково-белковым взаимодействиям и внутриклеточному транспорту.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген включает аминокислоты 1–100 человеческого PER2 (O15055), N-концевую область, которая хорошо консервативна и, вероятно, будет генерировать антитела, распознающие как полноразмерные, так и укороченные изоформы.
• Для Вестерн-блоттинга (WB) ожидайте полосу примерно на 137 кДа; используйте ядерные или цельно-клеточные лизаты из человеческих тканей или клеточных линий, известных экспрессией PER2 (например, скелетная мышца, поджелудочная железа). Уровни эндогенного PER2 колеблются в течение циркадного цикла — рассмотрите возможность сбора образцов в определенные циркадные временные точки (zeitgeber times).
• Для применения в ИФА, сочетание антитела с детектирующим реагентом, нацеленным на неперекрывающийся эпитоп, может повысить чувствительность и специфичность; валидируйте динамический диапазон с использованием рекомбинантного белка PER2 или контролируемых клеточных лизатов.
• В хроматин-иммунопреципитации (ChIP) антитело может обогащать промоторные области часовых генов, содержащие E-box (например, PER1, CRY1). Включайте соответствующие негативные контрольные регионы и подтверждайте обогащение с помощью qPCR в условиях синхронизированных часов.
• Учитывая роль посттрансляционных модификаций в функции PER2, рассмотрите использование ингибиторов фосфатаз или денатурирующих условий при изучении фосфорилирование-зависимых взаимодействий или локализации.

CamelBio: Ваш мост к комплексным решениям

CamelBio предоставляет комплексный портфель высококачественных сырьевых материалов для ИВД, технических услуг и консалтинга — от концепции до клиники. Это моноклональное антитело к PER2 поддерживает исследования циркадных ритмов, расстройств сна и метаболизма, дополняя наш обширный ассортимент валидированных антител, пар антигенов и вспомогательных реагентов. Используйте наш опыт для ускорения разработки ваших анализов с надежными, партионно-консистентными материалами и индивидуальными решениями по поиску редких или новых мишеней.