PE/Cyanine7 Кроличьи моноклональные антитела против CD8a человека/обезьяны для проточной цитометрии - P01732

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическое обоснование: Функция и локализация CD8a

• Ген CD8A кодирует альфа-цепь поверхностного гликопротеина Т-клеток CD8, критического корецептора в адаптивном иммунитете. Он существует в виде либо связанного дисульфидными связями альфа/бета-гетеродимера, либо альфа/альфа-гомодимера.
• Альфа-цепь CD8 функционирует как корецептор для молекул МНС класса I, взаимодействуя одновременно с Т-клеточным рецептором (TCR) и МНС I на антигенпрезентирующих клетках. Это рекрутирует тирозинкиназу Src LCK, запуская сигнальные пути вниз по каскаду, которые приводят к активации цитотоксических Т-лимфоцитов, продукции цитокинов и уничтожению клеток-мишеней.
• В естественных киллерах (NK-клетках) гомодимеры CD8A обеспечивают механизм выживания и способствуют конъюгации с множественными клетками-мишенями и их лизису. Они также способствуют выживанию и дифференцировке активированных лимфоцитов в Т-клетки памяти CD8.
• Субклеточная локализация: в основном на клеточной мембране в виде трансмембранного белка типа I с одним прохождением. Также секретируется растворимая форма, образующаяся в результате альтернативного сплайсинга.
• Тканевая специфичность: В Т-клетках тимусного происхождения CD8 обычно состоит из альфа/бета-гетеродимера. Гомодимеры CD8A обнаруживаются на субпопуляциях NK-клеток, Т-клеток памяти, внутриэпителиальных лимфоцитов, моноцитов и дендритных клеток. Экспрессия повышается на плазмоцитоидных дендритных клетках при вирусной стимуляции.
• Посттрансляционные модификации включают гликозилирование, что объясняет наблюдаемый молекулярный вес выше прогнозируемого (немодифицированный ~26 кДа; зрелые формы — 21, 25 и 30 кДа), и пальмитоилирование, которое якорит белок в липидных рафтах.

Экспериментальное руководство и технические советы

• Иммуноген, использованный для получения этого антитела, представляет собой рекомбинантный белок, соответствующий аминокислотам 22-182, который охватывает внеклеточный домен CD8A. Этот регион критически важен для взаимодействия с МНС I и экспонирован на поверхности клетки, что делает его идеальной мишенью для приложений проточной цитометрии.
• Для проточной цитометрии (FC) проведите титрование антитела для определения оптимальной концентрации для вашего конкретного образца. Включите соответствующие контрольные антитела изотипа, конъюгированные с тем же флуорофором (PE/Cyanine7), для оценки неспецифического связывания.
• Поскольку PE/Cyanine7 является тандемным красителем, избегайте длительного воздействия света и фиксаторов, которые могут деградировать краситель. Рассмотрите возможность использования контроля компенсации при проведении многоканальных панелей для коррекции спектрального перекрытия.
• Валидируйте работу антитела, используя известные положительные и отрицательные популяции клеток: например, Т-клетки периферической крови человека (CD8+ положительные) по сравнению с В-клетками (отрицательные) или соответствующими клеточными линиями.
• Если вы обнаруживаете внутриклеточный CD8A (например, в активированных или резидентных Т-клетках тканей), оптимизируйте условия фиксации и пермеабилизации, сохраняющие эпитоп и флуорофор.

CamelBio: Ваш мост по поиску поставщиков «в одном окне»

Как специализированный партнер по реагентам для IVD, CamelBio предоставляет исследовательским и диагностическим лабораториям беспрепятственный доступ к критически важным реагентам, таким как эти моноклональные антитела против CD8a, для биологии Т-клеток и иммунного профилирования. Мы предлагаем валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, вспомогательные реагенты оптом и специализированную поддержку в поиске сырья для редких мишеней — охватывая весь ваш рабочий процесс от концепции до клиники с единой точкой контакта.