Моноклональное антитело крысы анти-мыши CD45R/B220, конъюгированное с PE, для проточной цитометрии — P06800 / P08575

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический фон: функция и локализация CD45R/B220

• CD45R/B220, кодируемый геном Ptprc, представляет собой тирозин-белковую фосфатазу рецепторного типа (PTPase), также известную как общий лейкоцитарный антиген (L-CA) и лимфоцитарный антиген 5 (Ly-5). Он преимущественно экспрессируется на гемопоэтических клетках, включая B- и T-лимфоциты, и существует в нескольких изоформах, образующихся в результате альтернативного сплайсинга.
• Этот белок служит критическим регулятором передачи сигналов через T-клеточный рецептор, модулируя активность киназ семейства Src, таких как LYN и FYN. Он дефосфорилирует LYN, влияя на нисходящие сигнальные каскады, необходимые для активации и коактивации T-клеток при связывании с DPP4.
• В иммунологических синапсах между антиген-презентирующими клетками (APC) и T-клетками CD45 взаимодействует с CLEC10A на незрелых дендритных клетках, который распознаёт CD45, несущий антиген Tn, на эффекторных T-клетках. Это взаимодействие помогает точно регулировать пороги активации T-клеток и ограничивать аутоагрессивные реакции (по аналогии).
• CD45 содержит два внутриклеточных фосфатазных домена: первый домен обладает каталитической активностью, тогда как второй, по-видимому, регулирует специфичность к субстратам. Внеклеточная область сильно гликозилирована и участвует во взаимодействиях с лигандами и функциях, специфичных для изоформ.
• Белок локализуется преимущественно в плазматической мембране и обогащён в мембранных рафтах и иммунологических синапсах, где он пространственно организует сигнальные комплексы после связывания с антигеном.
• Как трансмембранный гликопротеин и представитель семейства белковых фосфатаз, CD45 является хорошо известным маркером линий иммунных клеток. Изоформа B220 специфически связана с B-клетками и широко используется для идентификации популяций B-клеток в моделях на мышах.
• Посттрансляционные модификации, включая фосфорилирование и гликозилирование, регулируют ферментативную активность CD45 и его экспрессию на поверхности клеток, тем самым влияя на динамику передачи сигналов в иммунных клетках.
• Хотя CD45 преимущественно изучается в лимфоидных клетках, он также играет роль в других субпопуляциях лейкоцитов, способствуя интеграции врождённых и адаптивных иммунных ответов.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген представляет собой синтетический пептид, полученный из консервативного участка CD45R/B220 мыши/человека. Ожидается, что полученное антитело будет распознавать CD45R/B220 мыши; при необходимости перекрёстную реактивность с ортологами человека следует подтвердить экспериментально.
• Это антитело конъюгировано с PE (фикоэритрином) — ярким флуорофором, подходящим для многокрасочных панелей проточной цитометрии. Рассмотрите возможность титрования антитела для оптимизации соотношения сигнал/шум и минимизации неспецифического связывания в используемой клеточной системе.
• Для проточной цитометрии используйте соответствующие красители жизнеспособности и реагенты для блокирования Fc-рецепторов, чтобы снизить фоновое окрашивание. Анализируйте свежие или правильно криоконсервированные лимфоидные ткани мыши (селезёнку, лимфатические узлы) для выявления популяций B-клеток, положительных по B220.
• С учётом указанного диапазона молекулярной массы (130–144 кДа), отражающего альтернативный сплайсинг и гликозилирование, при адаптации продукта для ортогональных методов выявления подтвердите экспрессию и размер полосы методом вестерн-блоттинга, хотя основным валидированным применением является проточная цитометрия.

CamelBio: ваш универсальный партнёр по снабжению

CamelBio предоставляет производителям диагностических систем и научно-исследовательским лабораториям комплексный доступ к высококачественному сырью для IVD, включая тщательно отобранный ассортимент конъюгированных моноклональных антител для иммунного профилирования. Наша цепочка поставок поддерживает оптовые закупки валидированных пар антител, вспомогательных реагентов и сырья для редких мишеней, оптимизируя разработку — от проектирования анализа до клинического применения. С этим антителом к CD45R/B220 мы предлагаем надёжный инструмент для фенотипирования B-клеток и мониторинга иммунного статуса, соответствующий строгим стандартам качества и обеспечивающий воспроизводимые результаты.