Поликлональное антитело кролика к Pan-Akt для WB, IP, IF/ICC, IHC-P, ELISA — P31749/P31751/Q9Y243

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация Pan-Akt (AKT1/AKT2/AKT3)

• AKT1 представляет собой серин/треонин-протеинкиназу, относящуюся к семейству киназ AKT (включающему AKT1, AKT2 и AKT3), которая регулирует метаболизм, пролиферацию, выживание и рост клеток, а также ангиогенез. Связанные публикации: PMID:11882383, PMID:15526160, PMID:15861136
• Он опосредует индуцированный инсулином захват глюкозы посредством транслокации SLC2A4/GLUT4 и регулирует синтез гликогена, ингибируя GSK3A и GSK3B.
• AKT1 способствует выживанию клеток посредством фосфорилирования MAP3K5/ASK1 по сайту Ser-83, ингибируя апоптоз, индуцированный окислительным стрессом. Связанные публикации: PMID:11154276
• Он активирует сигнальный путь mTORC1 посредством фосфорилирования TSC2, что приводит к синтезу белка и росту клеток. Связанные публикации: PMID:12150915, PMID:12172553
• AKT1 фосфорилирует транскрипционные факторы FOXO (FOXO1, FOXO3, FOXO4), что приводит к их удержанию в цитоплазме и ингибированию их проапоптотических функций. Связанные публикации: PMID:10358075
• Он положительно регулирует NF-kappa-B-зависимую транскрипцию и активность CREB1, усиливая экспрессию генов, способствующих выживанию клеток (например, BCL2 и MCL1). Связанные публикации: PMID:9829964
• На субклеточном уровне AKT1 локализуется в цитоплазме, ядре, клеточной мембране и межмембранном пространстве митохондрий, что отражает многообразие его сигнальных функций.
• К основным посттрансляционным модификациям относятся фосфорилирование (активация), ацетилирование, гликозилирование и убиквитинирование, что отмечено в ключевых словах UniProt.
• AKT1 повсеместно экспрессируется в тканях человека; повышенные уровни отмечаются при раке предстательной и молочной железы, особенно для формы, фосфорилированной по Tyr-176, в процессе прогрессирования рака молочной железы.

Рекомендации по экспериментам и технические советы

• Иммуноген охватывает консервативный участок (аа 311–480) человеческих AKT1, AKT2 и AKT3, что позволяет прогнозировать широкую реактивность pan-Akt в отношении всего семейства AKT.
• При проведении вестерн-блоттинга учитывайте наличие нескольких полос, соответствующих изоформам AKT: около 48 кДа (AKT1), около 55 кДа (AKT2) и около 51/54 кДа (AKT3). Специфичность полос следует подтверждать с использованием изоформоспецифичных контролей или нокдауна с помощью siRNA.
• Для иммунофлуоресценции/иммуногистохимии обычно подходит фиксация метанолом или формальдегидом; однако для внутриклеточных мишеней может потребоваться пермеабилизация.
• Поскольку это поликлональное антитело, следует учитывать вариабельность титра и аффинности от партии к партии; рекомендуется проводить титрование антитела для каждой новой партии и каждого применения.
• При иммунопреципитации для оптимального захвата IgG кролика используйте шарики с белком A/G.
• Для применения в ELISA может потребоваться оптимизированный буфер для сорбции и система детекции; протестируйте несколько концентраций для максимизации отношения сигнал/шум.

CamelBio: единое решение для поиска материалов

CamelBio предоставляет производителям диагностических продуктов, лабораториям и научно-исследовательским институтам единый доступ к сырью для IVD, включая высококачественные антитела к ключевым сигнальным мишеням, таким как AKT. Независимо от того, нужны ли вам валидированные пары антител для сэндвич-ELISA, оптимизированные поликлональные или моноклональные антитела либо вспомогательные реагенты оптом, CamelBio оптимизирует процесс снабжения от разработки концепции до клинического применения. Сотрудничайте с нами, чтобы ускорить исследования сигнального пути AKT и разработку тест-систем.