PAK1 Кроличье mAb для WB, IF/ICC, ELISA - Q13153

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация PAK1

• Кодируемый геном PAK1, PAK1 (p21-активируемая киназа 1) представляет собой серин/треонин-протеинкиназу, также известную как alpha-PAK, p65-PAK и PAKalpha. Она принадлежит к семейству киназ PAK, которые действуют как эффекторы для малых GTPаз CDC42 и RAC1.
• PAK1 служит критическим сигнальным узлом нижестоящим от интегринов и рецепторных тирозинкиназ, регулируя разнообразные клеточные процессы, включая динамику цитоскелета, клеточную адгезию, миграцию, пролиферацию, апоптоз, митоз и везикуло-опосредованный транспорт (PubMed:10551809, PubMed:11896197, PubMed:12876277). Связанные ссылки: PMID:10551809 PMID:11896197 PMID:12876277
• При активации GTP-связанными CDC42 и RAC1, PAK1 связывает GTPазы семейства Rho с путем JNK MAP киназы и фосфорилирует нижестоящие мишени, такие как MAP2K1, RAF1 и LIMK1, влияя тем самым на экспрессию генов и ремоделирование актина (PubMed:8805275, PubMed:9528787, PubMed:11733498, PubMed:23633677). Связанные ссылки: PMID:8805275 PMID:9528787 PMID:11733498 PMID:23633677
• PAK1 локализуется в нескольких субклеточных компартментах, включая цитоплазму, фокальные адгезии, ламеллиподии, мембранные складки, инвадоподии, нуклеоплазму и центросомы, что согласуется с её плейотропными ролями в подвижности клеток, адгезии и ядерной сигнализации.
• Киназа играет роль в реорганизации актинового цитоскелета и комплексов фокальной адгезии, напрямую фосфорилируя регуляторы, такие как легкая цепь миозина и кофилин, чтобы модулировать сократимость актомиозина и форму клетки (PubMed:9032240, PubMed:9395435). Связанные ссылки: PMID:9032240 PMID:9395435
• В нейронах PAK1 необходима для формирования дендритных шипиков, развития возбуждающих синапсов и ГАМКергической ингибиторной передачи, частично через стабилизацию F-актина и фосфорилирование регуляторной легкой цепи миозина II.
• PAK1 вовлечена в рак: она сверхэкспрессируется в клетках и тканях рака желудка (PubMed:25766321), способствует миграции и инвазии клеток и фосфорилирует субстраты, участвующие в ремоделировании хроматина (MORC2, PubMed:23260667) и эпителиально-мезенхимальном переходе (SNAI1, PubMed:15833848). Связанные ссылки: PMID:25766321 PMID:23260667 PMID:15833848
• Кроме того, PAK1 участвует в секреции инсулина (PubMed:22669945), ответе на повреждение ДНК и динамике стрессовых гранул (PubMed:20417602). Связанные ссылки: PMID:22669945 PMID:20417602

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуногеном является синтетический пептид, охватывающий аминокислоты 1-100 человеческого PAK1, что соответствует N-концевой области. Вероятно, эта область консервативна у человека, мыши и крысы, что согласуется с заявленной перекрестной реактивностью.
• Для Вестерн-блоттинга (WB) предсказанная молекулярная масса PAK1 составляет приблизительно 61 кДа; однако посттрансляционные модификации или сплайс-варианты могут приводить к появлению дополнительных полос. Используйте соответствующие восстанавливающие условия и валидируйте с известными положительными контролями (например, лизатами клеток HeLa или MCF-7).
• При иммунофлуоресценции (IF/ICC) PAK1 демонстрирует динамическое распределение в субклеточных компартментах, появляясь в фокальных адгезиях, мембранных складках и ядре в зависимости от типа клеток и стимуляции. Фиксация параформальдегидом и пермеабилизация Triton X-100 или метанолом могут быть подходящими, но рекомендуется оптимизация для вашей конкретной клеточной линии и условий.
• Для ELISA антитело может использоваться в прямом или непрямом формате. Рассмотрите возможность использования пептида-иммуногена в качестве положительного контроля для установления чувствительности и специфичности анализа.
• Данное антитело не тестировалось в других применениях; если используется для IP, ChIP или функционального блокирования, рекомендуется тщательная валидация в соответствующей системе образцов.

CamelBio: Ваш мост для комплексных поставок

CamelBio поддерживает производителей диагностических средств, исследовательские лаборатории и разработчиков IVD комплексными решениями в области сырьевых материалов — от валидированных пар антител и оптимизированных моноклональных/поликлональных антител до объемных вспомогательных реагентов. Независимо от того, сосредоточена ли ваша работа на сигналинге PAK1 в раке, нейробиологии или метаболических путях, наша платформа «все в одном» упрощает закупки и ускоряет сроки выполнения проектов. Для разработки пользовательских антител, производства рекомбинантных белков или поиска редких мишеней команда CamelBio готова помочь с гибкими вариантами поставок, адаптированными под ваши клинические или R&D потребности.