Кроличья поликлональная антитело к NLRP3 для Вестерн-блоттинга (WB), ИФ/ИЦХ (IF/ICC), ИФА (ELISA) - Q8R4B8

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическое обоснование: Функция и локализация NLRP3

• NLRP3 (белок, содержащий домены NACHT, LRR и PYD, также известный как криопирин) — это внутриклеточный сенсор, образующий основной компонент инфламмасомы NLRP3, которая опосредует активацию в ответ на нарушение целостности мембраны, приводя к секреции IL1B и IL18, а также пироптозу. Связанные ссылки: PMID:19362020, PMID:23582325, PMID:26642356

• NLRP3 инициирует формирование полимерного комплекса инфламмасомы с CASP1 и PYCARD/ASC, который активирует каспазу-1 для расщепления про-IL1B, про-IL18 и газдермина-D (GSDMD), что приводит к высвобождению цитокинов и пироптотической гибели клеток. Связанные ссылки: PMID:16407889, PMID:18403674, PMID:19362020, PMID:16546100, PMID:17008311, PMID:26642356

• Разнообразные стимулы, связанные с патогенами и повреждениями, включая внеклеточный АТФ, нигерицин, кристаллы (урат, холестерин), бета-амилоид и частицы (асбест, кремнезем), запускают активацию NLRP3, почти всегда сходясь на оттоке ионов K+ из клетки. Связанные ссылки: PMID:16407888, PMID:16407889, PMID:16407890, PMID:23809161

• Активация инфламмасомы NLRP3 также необходима для секреции HMGB1 и регулирует гомеостатический ответ заживления ран, который направляет миграцию нейтрофилов в участки некроза, не повреждая здоровые ткани. Связанные ссылки: PMID:22801494, PMID:20947763

• При активации NLRP3 транспортируется в центр организации микротрубочек (MTOC), а затем в везикулы диспергированной сети аппарата Гольджи (dTGN), где связывается с фосфатидилинозитол-4-фосфатом (PtdIns4P) и собирает активные инфламмасомы; процесс разблокируется белком NEK7. Связанные ссылки: PMID:26814970, PMID:34615873, PMID:34861190, PMID:30487600

• NLRP3 высоко экспрессируется в лейкоцитах периферической крови (Т-лимфоцитах Th2 и макрофагах) и на низком уровне в остеобластах, что согласуется с его иммунологической и воспалительной ролью. Связанные ссылки: PMID:15302403, PMID:16546100, PMID:26098997, PMID:28847925, PMID:17907925

• Независимо от своей функции каркаса инфламмасомы, NLRP3 действует как регулятор транскрипции в клетках Th2, связываясь с ДНК и модулируя экспрессию IL4, IL5, IL13 и других генов, критически важных для дифференцировки Th2 и аллергического воспаления. Связанные ссылки: PMID:26098997

• NLRP3 обладает собственной АТФазной активностью и регулируется различными посттрансляционными модификациями, включая фосфорилирование, пальмитоилирование и убиквитинирование, которые контролируют порог его активации и взаимодействия. Связанные ссылки: PMID:34861190

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген охватывает аминокислоты 1–93 мышиного NLRP3, область, содержащую пириновый домен (PYD). Учитывайте, что антитело может обнаруживать как белок полной длины, так и фрагменты, содержащие PYD; проверьте специфичность в вашей модельной системе.
• Для Вестерн-блоттинга предсказанная молекулярная масса составляет ~118 кДа; однако посттрансляционные модификации могут привести к появлению дополнительных полос. Используйте соответствующие положительные и отрицательные контроли (например, лизаты макрофагов, стимулированные LPS+ATP) и оптимизируйте процент геля для белков с высокой молекулярной массой.
• При иммунофлуоресценции/иммуноцитохимии (IF/ICC) NLRP3 может демонстрировать пятнистое или диффузное окрашивание в зависимости от состояния активации. Условия фиксации и пермеабилизации должны быть оптимизированы для сохранения его естественной локализации.
• Для применения в ИФА может потребоваться спаривание с другим специфичным к NLRP3 антителом для сэндвич-формата; поликлональная природа может быть преимуществом для захвата или детекции.

CamelBio: Ваш мост для закупок полного цикла

CamelBio предлагает производителям диагностических средств и исследовательским лабораториям комплексный доступ к высококачественному сырью для IVD, включая широкий портфель антител, антигенов и вспомогательных реагентов. Это антитело к NLRP3 поддерживает исследовательские изучения сигнальных путей инфламмасомы, стерильного воспаления и иммунной регуляции. Сотрудничайте с CamelBio для надежных поставок и технической поддержки, чтобы оптимизировать разработку ваших анализов от концепции до клиники.