NLRP3 кроличья mAb - Q8R4B8

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический фон: функция и локализация NLRP3

• NLRP3, также известный как криопирин, является членом семейства внутриклеточных сенсоров NLRP (содержащих домены NACHT, LRR и PYD), которые собираются в инфламмасому NLRP3. Альтернативные названия включают NALP3, CIAS1, Pypaf1, Mmig1 и другие.
• Являясь сенсорным компонентом, NLRP3 обнаруживает широкий спектр сигналов, связанных с патогенами и повреждениями (например, АТФ, нигерицин, кристаллы, амилоид-β), запуская формирование инфламмасомы. Это приводит к активации каспазы-1, которая расщепляет про-IL-1β и про-IL-18 до их активных форм и индуцирует пироптоз через газдермин-D. Связанные ссылки: PMID:19362020, PMID:23582325, PMID:26642356
• Активация требует выхода K⁺ и часто включает релокализацию в транс-сеть Гольджи или сайты контакта митохондрий и ЭПР. АТФазная активность NLRP3 необходима для сборки инфламмасомы. Связанные ссылки: PMID:34861190
• NLRP3 также функционирует независимо как фактор транскрипции, который способствует дифференцировке Th2, связываясь с промотором IL-4 и регулируя экспрессию цитокинов Th2, тем самым влияя на аллергическую астму и рост опухолей. Связанные ссылки: PMID:26098997
• Субклеточная локализация является динамической: в покоящемся состоянии NLRP3 находится в цитозоле и эндоплазматическом ретикулуме; при активации он перемещается в центр организации микротрубочек, в аппарат Гольджи и секретируется. Он также может быть обнаружен в ядре.
• Высокая экспрессия в лейкоцитах периферической крови, включая макрофаги и T-лимфоциты Th2, что согласуется с его ролью в врожденном и адаптивном иммунитете. Связанные ссылки: PMID:15302403, PMID:26098997
• Посттрансляционные модификации включают фосфорилирование, пальмитоилирование и убиквитинирование, регулирующие его активность и стабильность. Ключевые слова: Активатор, Связывание АТФ, Инфламмасома, Лейцин-богатые повторы, Референсный протеом, Ubl конъюгация.

Экспериментальное руководство и технические советы

• Это антитело было получено против аминокислот 1–150 мышиного NLRP3, что предполагает распознавание N-терминального PYD-домена. Оно может обнаруживать как полноразмерную, так и расщепленную формы.
• Для вестерн-блоттинга (белок 118 кДа) используйте 6–8% SDS-PAGE гель и увеличенное время переноса (например, 2 часа при 100 В) для белков с высоким молекулярным весом. Включите положительный контрольный лизат из макрофагов мыши или клеток THP-1, обработанных LPS и нигерицином.
• Для иммунофлуоресценции пермеабилизируйте клетки 0,1% Triton X-100 для доступа к цитозольному и связанному с органеллами NLRP3. Используйте совместное окрашивание маркерами органелл для изучения активационной транслокации.
• При иммунопреципитации используйте 1–2 мкг антитела на 500 мкг лизата; белок может потребовать сшивки или осторожного лизиса для сохранения комплексов инфламмасомы.
• Проверяйте все применения с использованием соответствующих тканей мыши или клеточных систем, так как кросс-реактивность зарегистрирована только для мыши.

CamelBio: Ваш мост для комплексного снабжения

CamelBio специализируется на предоставлении производителям диагностических средств и исследовательским лабораториям полного спектра сырья для IVD, от концепции до клиники. Для проектов, связанных с NLRP3 и путем инфламмасомы, мы поставляем валидированные пары антител, моноклональные антитела, рекомбинантные белки и вспомогательные реагенты. Наша услуга комплексного снабжения упрощает закупку, обеспечивая согласованность и качество для разработки ваших иммуноанализов и исследований врожденного иммунитета.