Кроличья поликлональная антитело к NLRP1 для Вестерн-блоттинга (WB), ИГХ (IHC-P), ИФ/МЦК (IF/ICC), ИФА (ELISA) - Q9C000

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическое обоснование: функция и локализация NLRP1

• NLRP1 (белок, содержащий домены NACHT, LRR и PYD 1) — это многодоменный белок, также известный как CARD7, DEFCAP, NAC и NALP1. Он служит сенсорным компонентом инфламмасомы NLRP1 — надмолекулярного комплекса, который собирается в цитозоле в ответ на сигналы, связанные с патогенами, и опосредует пироптоз и высвобождение провоспалительных цитокинов. Связанные ссылки: PMID:12191486, PMID:17349957, PMID:22665479, PMID:22801494, PMID:33852854, PMID:35594856
• При активации NLRP1 рекрутирует прокаспазу-1 (proCASP1) через адаптерный белок PYCARD/ASC, запуская аутопротеолиз CASP1. Активная CASP1 расщепляет про-IL1B, про-IL18 и газдермин-D (GSDMD), что приводит к секреции цитокинов и пироптотической гибели клеток. В условиях дефицита GSDMD инфламмасомы NLRP1 могут задействовать CASP8 и газдермин-E (GSDME). Связанные ссылки: PMID:12191486, PMID:17349957, PMID:22665479, PMID:33852854, PMID:35594856
• NLRP1 обнаруживает разнообразные сигналы, связанные с патогенами и повреждениями: протеазы 3C риновируса человека расщепляют NLRP1, активируя его; длинная двухцепочечная РНК (dsRNA) действует как прямой сенсор; УФ-В облучение индуцирует столкновения рибосом, которые активируют NLRP1 посредством фосфорилирования MAP3K20; а также ингибитор дипептидилпептидазы Val-boroPro запускает активацию инфламмасомы. Связанные ссылки: PMID:33093214, PMID:33243852, PMID:35857590
• NLRP1 конститутивно процессируется внутри своего домена FIIND, образуя нековалентно связанные N- и C-концевые фрагменты, которые поддерживают аутоингибированное состояние. Сигналы от патогенов или повреждений индуцируют убиквитинирование и протеасомную деградацию N-концевого фрагмента, освобождая C-концевой фрагмент для олигомеризации и зарождения образования инфламмасомы. Связанные ссылки: PMID:33093214, PMID:33731929, PMID:33731932
• Тканевая экспрессия широко распространена, с высокими уровнями в первичных иммунных клетках (нейтрофилы, моноциты/макрофаги, дендритные клетки, лимфоциты) и в железистом эпителии желудочно-кишечного, дыхательного и репродуктивного трактов. Также он обнаруживается в коже (кератиноциты, фибробласты, волосяные фолликулы), нейронах головного мозга и половых клетках яичек. Связанные ссылки: PMID:11113115, PMID:17164409, PMID:15285719, PMID:23349227, PMID:27662089
• На субклеточном уровне NLRP1 локализуется в цитоплазме, цитозоле и ядре, а при активации рекрутируется в комплекс инфламмасомы. Он связывает АТФ и проявляет АТФазную активность, что может быть необходимо для его функционирования. Связанные ссылки: PMID:11113115, PMID:15212762, PMID:33243852
• Ключевые биологические роли включают врожденный иммунитет, воспалительный ответ, противовирусную защиту и взаимодействие «хозяин–вирус». Мутации в NLRP1 связаны с аутоиммунными заболеваниями и эктодермальной дисплазией.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Для Вестерн-блоттинга (Western blotting) NLRP1 имеет прогнозируемую молекулярную массу около 166 кДа. Используйте полиакриламидный гель с низким процентом (например, 6–8%) и увеличенное время влажного переноса (на ночь при низком напряжении), чтобы обеспечить эффективный перенос этого крупного белка. Включайте высокомолекулярный преокрашенный маркер в качестве ориентира.
• Для ИГХ (IHC-P) рекомендуется retrieval антигена (буфер цитрата или ЭДТА, индуцированный нагреванием). Провалидируйте антитело в интересующей вас ткани (человек, мышь или крыса) с использованием соответствующих положительных и отрицательных контролей, а также проведите титрацию для минимизации фона.
• Для ИФ/МЦК (IF/ICC) оптимизируйте фиксацию (например, 4% PFA) и пермеабилизацию (например, 0,1% Triton X-100), чтобы обеспечить доступ к преимущественно цитоплазматическому/ядерному антигену. Совместное окрашивание маркерами органелл может помочь подтвердить локализацию.
• Поскольку это поликлональное антитело, каждая партия может демонстрировать незначительные различия; мы рекомендуем провести пробные эксперименты для установления оптимального рабочего разбавления для вашего конкретного метода и образца.

CamelBio: Ваш мост для закупок полного цикла

CamelBio оптимизирует закупки сырья для IVD, предлагая валидированные антитела, пары антител и вспомогательные реагенты в одном месте. Это кроличье поликлональное антитело к NLRP1 поддерживает исследования врожденного иммунитета и инфламмасомы, а мы можем помочь с индивидуальным поиском редких мишеней, оптовыми заказами и техническими консультациями для ускорения вашей диагностической разработки. Наша цель — обеспечить ваш путь от концепции к клинике надежными материалами, готовыми к исследованиям.