Кроличье pAb против NFKB1 для Вестерн-блоттинга, IF/ICC, ELISA - P19838

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация NFKB1

• NFKB1 кодирует белок-предшественник p105 и его протеолитически процессированную субъединицу p50 (ядерный фактор NF-kappa-B p50). В то время как p105 функционирует как IκB-подобный ингибитор, удерживающий димеры NF-κB в цитоплазме, образование p50 обеспечивает связывание с ДНК и регуляцию транскрипции. Связанные ссылки: PMID:1423592
• Активная субъединица p50 ассоциирует с RELA/p65, образуя гетеродимер p65-p50 — мощный транскрипционный активатор, который связывается с консенсусной последовательностью κB 5'-GGRNNYYCC-3' в энхансерах генов-мишеней. Связанные ссылки: PMID:1740106, PMID:7830764
• Комплексы NF-κB обычно секвестрированы в цитоплазме ингибиторами IκB. Каноническая активация включает фосфорилирование, опосредованное киназой IκB (IKK), и последующую деградацию IκB протеасомой, что высвобождает NF-κB для транслокации в ядро.
• NF-κB — плейотропный транскрипционный фактор, присутствующий почти во всех типах клеток, и выступает в роли центрального медиатора иммунных и воспалительных реакций, а также выживания, пролиферации и апоптоза клеток.
• Гомодимер p50-p50 функционирует как транскрипционный репрессор, если не ассоциирован с BCL3, который превращает его в активатор. Таким образом, состав димера определяет экспрессию генов-мишеней.
• NFKB1 в основном локализуется в цитоплазме в покоящихся клетках, но перемещается в ядро после активации, что соответствует его роли как фактора, реагирующего на сигналы.
• Многочисленные посттрансляционные модификации — включая фосфорилирование, ацетилирование и убиквитинирование — тонко регулируют стабильность NFKB1, его ДНК-связывающую активность и транскрипционный выход.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген (аминокислоты 41–365) находится в N-концевом Rel-гомологичном домене, консервативном между p105 и p50. При вестерн-блоттинге могут появляться полосы как полноразмерного p105 (~105 кДа), так и процессированного p50 (~50 кДа); идентичность полос следует подтверждать с использованием соответствующих клеточных экстрактов и обработок.
• Для иммунофлуоресценции/ИЦХ: NFKB1 преимущественно цитоплазматический в базальных условиях; стимуляция TNF-α или IL-1β может индуцировать быструю ядерную транслокацию. Включайте необработанные контроли для визуализации перераспределения между компартментами клетки.
• При проведении ELISA рекомендуется использовать рекомбинантный белок NFKB1 (p50) и парные детектирующие антитела для проверки специфичности и чувствительности. Оптимизируйте условия нанесения на планшет и блокировки для вашего формата анализа.
• Поскольку это поликлональное антитело, воспроизводимость от партии к партии следует проверять со стандартным позитивным контрольным лизатом или рекомбинантным белком.

CamelBio: Ваш мост к комплексным поставкам

CamelBio предлагает комплексные решения по поставке сырья для IVD, поддерживая производителей и исследователей от концепции до клиники. Это кроличье pAb против NFKB1 служит для исследований в области сигналинга NF-κB и иммуноонкологии — мы можем предоставить валидированные пары антител, поликлональные и моноклональные антитела оптом, а также вспомогательные реагенты для оптимизации разработки ваших диагностических средств. Для поиска редких или кастомизированных мишеней наша команда готова стать мостом для удовлетворения ваших потребностей в поставках.