Кроличья поликлональная антитело к монометил-YAP1-K342 (P46937) для Вестерн-блоттинга и ИФА

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический фон: функция и локализация YAP1

• YAP1 (Yes-associated protein 1) функционирует как транскрипционный коактиватор и корепрессор, выступая в качестве ключевого нижестоящего эффектора сигнального пути Hippo. Этот путь критически регулирует размер органов и подавляет канцерогенез, ограничивая пролиферацию клеток и способствуя апоптозу (PMID:17974916, PMID:18280240, PMID:18579750, PMID:21364637, PMID:30447097). Связанные ссылки: PMID:17974916, PMID:18280240, PMID:18579750, PMID:21364637, PMID:30447097.
• Фосфорилирование киназами LATS1/2 изолирует YAP1 в цитоплазме, предотвращая его транслокацию в ядро и последующую активацию транскрипции, зависимой от TEAD. Это регуляция, зависящая от фосфорилирования, является центральной для его роли в контроле роста клеток, роста в независимости от прикрепления и эпителиально-мезенхимального перехода (EMT) (PMID:18158288, PMID:26598551, PMID:34404733). Связанные ссылки: PMID:18158288, PMID:26598551, PMID:34404733.
• YAP1 подвергается обширным посттрансляционным модификациям, включая фосфорилирование по множеству остатков серина, треонина и тирозина, а также убиквитинирование и метилирование. Метилирование лизина 342 (K342) — это специфическая модификация, которую распознает это антитело. Хотя в UniProt она не охарактеризована широко, метилирование в этом сайте может влиять на взаимодействия или стабильность YAP1, добавляя еще один уровень регуляции пути Hippo.
• Субклеточная локализация YAP1 динамически регулируется; в основном она локализуется в ядре при низкой плотности клеток и перемещается в цитоплазму при высокой плотности клеток, процесс, модулируемый фосфорилированием. YAP1 также ассоциируется с плотными контактами и клеточной мембраной в ответ на механические сигналы (PMID:18158288, PMID:20048001, PMID:31835537, PMID:25849865). Связанные ссылки: PMID:18158288, PMID:20048001, PMID:31835537, PMID:25849865.
• Анализ экспрессии, специфичной для тканей, показывает повышенные уровни YAP1 в некоторых раках печени и простаты, что подчеркивает его онкогенный потенциал. Кроме того, изоформы, лишенные домена трансактивации, обнаруживаются в стриарных нейронах пациентов с болезнью Гентингтона (PMID:16461361, PMID:17974916, PMID:7782338). Связанные ссылки: PMID:16461361, PMID:17974916, PMID:7782338.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Это антитело было получено с использованием синтетического монометилированного пептида, соответствующего остаткам, окружающим K342 человеческого YAP1, что делает его специфичным для метилированной формы. Для оптимального обнаружения при Вестерн-блоттинге рассмотрите возможность использования протоколов фракционирования ядра и цитоплазмы для обогащения YAP1, поскольку его локализация влияет на содержание.
• При проведении ИФА включите контроль с неметилированным пептидом для подтверждения специфичности. Подход конкурентного ИФА с метилированными и неметилированными пептидами может помочь подтвердить специфичность сигнала.
• Перекрестная реактивность прогнозируется для мыши и крысы на основе гомологии последовательностей; однако, перед проведением крупномасштабных экспериментов проверьте реактивность в соответствующей ткани или клеточной линии.
• Для Вестерн-блоттинга подходят стандартные условия блокировки и детекции; однако, если появляются неспецифические полосы, рассмотрите возможность оптимизации разведения антитела (например, 1:500-1:2000) и состава блокирующего буфера.

CamelBio: Ваш мост для комплексного снабжения

В CamelBio мы специализируемся на предоставлении высококачественного сырья для IVD производителям диагностических средств и исследовательским лабораторам по всему миру. Наш портфель включает валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, а также вспомогательные реактивы оптом, адаптированные к вашим потребностям в разработке анализов. Это кроличье поликлональное антитело к MonoMethyl-YAP1-K342 демонстрирует нашу приверженность предложению редких и специфичных к модификациям реагентов для изучения мишеней пути Hippo, поддерживая ваши исследования от концепции до клиники. Свяжитесь с нами для получения индивидуальных решений по снабжению и техническим консультациям.