Кроличье поликлональное антитело к моно-метилированному NONO/p54nrb (R357/R365) (Q15233) для вестерн-блоттинга, иммунофлуоресценции/иммуноцитохимии, ELISA

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: функции и локализация NONO/p54nrb

NONO (Non-POU domain-containing octamer-binding protein), также известный как p54nrb, — это многофункциональный ДНК- и РНК-связывающий белок, участвующий в разнообразных ядерных процессах. Он связывает как двуцепочечную, так и одноцепочечную ДНК и РНК, участвует в сплайсинге пре-мРНК, вероятно, в виде гетеродимера с SFPQ, и взаимодействует с U5 мяРНК. NONO необходим для образования параспеклов вместе с PSPC1 и вносит вклад в репарацию ДНК через негомологичное соединение концов (NHEJ), стабилизируя концы ДНК с помощью димера Ku70/Ku80.

В регуляции транскрипции NONO формирует комплекс с SFPQ и NR5A1, модулируя активность промотора CYP17. Он также регулирует циркадные ритмы, подавляя трансактивацию CLOCK-BMAL1, влияет на организацию ГАМКергических синапсов и способствует дифференцировке нейронов, рекрутируя TET1 в геномные локусы.

NONO играет критическую роль во врожденном иммунитете, входя в состав HDP-RNP комплекса, который служит платформой для фосфорилирования IRF3, тем самым активируя путь cGAS-STING в ответ на инфекцию ДНК-вирусами. Во время инфекции ВИЧ-2 NONO взаимодействует с вирусным капсидным белком p24, облегчая распознавание вирусной ДНК cGAS.

На субклеточном уровне NONO преимущественно локализуется в ядре, концентрируясь в ядрышках, ядерных спеклах и точечных параспеклах, прилегающих к сплайсинговым спеклам.

NONO широко экспрессируется в сердце, мозге, плаценте, легких, печени, скелетных мышцах, почках, поджелудочной железе и различных клеточных линиях опухолей молочной железы. Белок подвергается обширным посттрансляционным модификациям, включая ацетилирование, фосфорилирование и метилирование (например, моно-метилирование по R456). Данное антитело специфически распознает моно-метилированную форму по аргининам 357 и 365.

Связанные ссылки: PMID:11525732, PMID:12403470, PMID:26571461, PMID:22416126, PMID:15590677, PMID:11897684, PMID:28712728, PMID:30270045, PMID:9341872, PMID:19608861, PMID:24129315

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Данное кроличье поликлональное антитело получено против синтетического пептида, несущего моно-метилирование по R357 и R365 белка человека NONO/p54nrb. Для вестерн-блоттинга ожидается полоса около 54 кДа. Специфичность рекомендуется подтверждать, сравнивая интенсивность сигнала при конкуренции с неметилированным пептидом или используя метилирование-специфичные контроли.
• При иммунофлуоресценции/иммуноцитохимии может наблюдаться ядерное окрашивание с обогащением в фокусах (параспеклах). Для подтверждения локализации рекомендуется совместное окрашивание с маркерами параспеклов (например, PSPC1).
• Заявлено, что антитело реагирует с образцами человека и крысы. Перекрестная реактивность с другими видами не тестировалась; рекомендуется проверять в вашей модельной системе.
• Оптимальные рабочие разведения необходимо определять эмпирически для каждого применения. Рекомендуется начинать с разведений 1:500–1:1000 для вестерн-блоттинга и 1:50–1:200 для иммунофлуоресценции/иммуноцитохимии, при необходимости корректируя.
• Антитело поставляется в жидкой форме в пакете со льдом; по получении хранить при −20°C. Следует избегать повторных циклов замораживания-оттаивания.

CamelBio: Ваш мост к комплексным поставкам

CamelBio — ваш всесторонний партнер в поиске сырья для in vitro диагностики, предлагающий валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, вспомогательные реагенты в больших объемах и разработку редких мишеней на заказ. Это метилирование-специфичное антитело к NONO/p54nrb отвечает потребностям нишевых исследований аргининового метилирования в процессинге РНК, репарации ДНК и врожденном иммунитете, дополняя нашу растущую портфель эпигенетических инструментов. От концепции до клиники CamelBio ускоряет ваши диагностические и исследовательские процессы благодаря надежным поставкам и технической поддержке.