Кроличья поликлональная антитела к монометилгистону H4-K20 (P62805) – антитело для эпигенетических исследований в методах WB, IHC, IF/ICC, ELISA

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация гистона H4

Гистон H4 является основным компонентом нуклеосомы — базовой единицы организации хроматина. Вместе с гистонами H2A, H2B и H3 он формирует октамер, вокруг которого оборачивается ДНК, обеспечивая упаковку генома в ядре клетки. Эта структурная роль является фундаментальной для всех процессов, связанных с матричным синтезом на ДНК, включая транскрипцию, репликацию, репарацию и сегрегацию хромосом.

Гистон H4 локализуется преимущественно в ядре и ассоциирован с хромосомами на протяжении всего клеточного цикла. Во время сперматогенеза специфические паттерны ацетилирования могут влиять на его ядерную локализацию.

Функция и взаимодействия гистона H4 динамически регулируются большим множеством посттрансляционных модификаций (ПТМ), которые часто называют «гистоновым кодом». К ним относятся ацетилирование, метилирование, фосфорилирование, цитруллинация, убиквитинирование и различные ацилирования по множеству остатков. Эти модификации изменяют структуру хроматина и рекрутируют эффекторные белки для модуляции экспрессии генов, ответа на повреждение ДНК и ремоделирования хроматина.

Среди этих модификаций метилирование лизина 20 (H4K20) является критической эпигенетической меткой. Монометилирование H4K20 (H4K20me1) участвует в активации транскрипции, прогрессии клеточного цикла и ответе на повреждение ДНК. Баланс между состояниями моно-, ди- и триметилирования этого сайта строго контролируется специфическими метилтрансферазами и деметилазами.

Это антитело было получено против синтетического пептида, соответствующего району K20 гистона H4 человека с монометильной модификацией. Оно разработано для специфического распознавания только монометилированной формы H4K20, что делает его ценным инструментом для изучения различных биологических эффектов разных состояний метилирования H4K20.

Связанные источники: UniProt P62805

Экспериментальное руководство и технические рекомендации

• Поскольку гистон H4 высоко консервативен у эукариот, прогнозируется реактивность этого антитела со многими видами. Однако перекрестную реактивность необходимо эмпирически подтвердить для систем, не относящихся к человеку, мыши или крысе.
• Для вестерн-блоттинга рекомендуется обогащение гистоновых белков или использование методов кислотной экстракции для улучшения детекции H4K20me1, поскольку гистоны могут быть маскированы большим количеством негистоновых белков в лизатах целых клеток.
• При использовании дот-блоттинга (DB) включайте контрольные образцы немодифицированного и монометилированного пептида для подтверждения специфичности к модификации.
• Для иммуногистохимии (IHC) может потребоваться шаг отвоения антигена из-за прочной ассоциации гистонов с ДНК в тканях, фиксированных формалином.
• При иммунофлуоресценции (IF/ICC) проведите совместное окрашивание с ядерным маркером для подтверждения ожидаемой ядерной локализации.
• В протоколах ELISA используйте иммобилизованные пептиды или экстракты гистонов. Убедитесь, что покрывающий антиген представляет эпитоп монометилированного K20 для оптимальной детекции.
• Это антитело специфично к монометил-K20 и не выявляет ди- или триметилированный K20, а также немодифицированный H4, согласно конструкции иммуногена. Тем не менее, всегда проверяйте специфичность в вашей системе образцов с использованием соответствующих негативных контролей (например, клеточных линий с измененным статусом метилирования H4K20).

CamelBio: ваш универсальный мост для поиска реагентов

CamelBio является комплексным поставщиком сырья для IVD, предоставляя производителям диагностики, лабораториям и научно-исследовательским институтам удобный доступ к высококачественным реагентам и индивидуальным техническим услугам. Для исследователей, изучающих эпигенетические модификации и хроматиновую биологию, мы поставляем широкий ассортимент гистоновых антител, включая валидированные антитела, специфичные к метилированию, как этот продукт к монометилгистону H4-K20. Помимо отдельных антител, CamelBio может помочь в подборе подходящих пар антител, массовом производстве оптимизированных реагентов и поиске редкого или трудно доступного сырья, обеспечивая эффективное продвижение вашего проекта от концепции до клинических исследований.