Кроличье поликлональное антитело к моно-метилированному гистону H3-R2 (Q16695/P68431) | Вестерн-блоттинг, иммунофлуоресценция/иммуноцитохимия, ИФА

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация гистона H3 (H3.1/H3.1t)

• Гистон H3 является основным компонентом нуклеосомы, он оборачивает и уплотняет ДНК, формируя хроматин. Это ограничивает доступность ДНК и играет ключевую роль в регуляции транскрипции, репарации ДНК, репликации ДНК и хромосомной стабильности. Доступность ДНК контролируется с помощью "гистонового кода" — сложного набора посттрансляционных модификаций (ПТМ) и ремоделирования нуклеосом.
• Белок локализуется в ядре и хромосомах.
• Существуют два основных значимых изоформа: H3.1 (кодируется множеством генов, например, H3C1, H3C2 и др., UniProt P68431) экспрессируется в большинстве соматических клеток, в то время как H3.1t (H3-4, HIST3H3, UniProt Q16695) специфичен для семенников.
• N-концевой хвост гистона H3 подвергается множественным ПТМ, включая ацетилирование, метилирование, фосфорилирование, цитруллинирование и другие. В частности, аргинин 2 (R2) может быть метилирован. Асимметричное диметилирование в этом сайте катализируется PRMT6 и связано с регуляцией транскрипции. Моно-метилирование R2 является промежуточным этапом и может иметь особые функциональные роли. Данное антитело специфически распознает моно-метилированную форму R2. Связанные ссылки: PMID:17898714, PMID:18077460, PMID:18079182

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуногеном является синтетический моно-метилированный пептид, соответствующий участку вокруг R2 гистона H3 человека. При выполнении вестерн-блоттинга рекомендуется использовать ядерные экстракты или препараты, обогащенные гистонами, для усиления сигнала. Предсказанная молекулярная масса составляет ~15 кДа, но полосы могут появляться несколько выше из-за ПТМ или взаимодействий белков.
• Для иммунофлуоресценции/иммуноцитохимии может потребоваться оптимизация условий фиксации и пермеабилизации. Поскольку гистон H3 локализован в ядре, рекомендуется пермеабилизация с Triton X-100 или метанолом. Проверьте картину окрашивания с помощью известных ядерных маркеров.
• В ИФА для подтверждения специфичности к моно-метилированному R2 в сравнении с немодифицированной или диметилированной формами рекомендуется использовать метилированный пептид в качестве иммобилизованного антигена.
• Предполагается широкая видовая перекрестная реактивность (человек, мышь, крыса и другие), но рекомендуется проверить реактивность в конкретной интересующей системе образцов, особенно для немлекопитающих видов.
• Поскольку это кроличье поликлональное антитело, для критических количественных анализов следует оценивать стабильность от партии к партии. Включение соответствующих положительных и отрицательных контролей (например, конкурентное ингибирование моно-метилированным пептидом) может повысить надежность данных.

CamelBio: Ваш мост к комплексным поставкам

CamelBio специализируется на предоставлении производителям диагностических систем, лабораториям и научно-исследовательским институтам комплексного доступа к сырьевым материалам для ИВД и техническим услугам. Это антитело к моно-метилированному гистону H3-R2 идеально подходит для применения в эпигенетических исследованиях и изучении хроматина. Помимо данного продукта, CamelBio может поставлять валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, вспомогательные реагенты оптом, а также помогать в поиске сырья для редких мишеней, чтобы ускорить разработку ваших ИВД-систем от концепции до клиники. Сотрудничайте с CamelBio для надежных и масштабируемых решений в области сырьевых материалов.