Моноклональное антитело кролика против монометил-Гистона H3-K9 (Q16695/P68431) для WB, IHC, ChIP, ELISA

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический фон: Функция и локализация гистона H3

Гистон H3 является основным компонентом нуклеосомы, фундаментальной повторяющейся единицы хроматина. Нуклеосомы наматывают и уплотняют ДНК, тем самым регулируя доступ для транскрипции, репликации и репарации. Как канонический зависимый от репликации гистон H3.1 (UniProt P68431), так и специфичный для тестикул вариант H3.1t (UniProt Q16695) имеют высококонсервативные N-концевые хвосты, в которых происходят ключевые регуляторные модификации.

N-концевой хвост гистона H3 подвергается разнообразным посттрансляционным модификациям (PTM), включая метилирование, ацетилирование, фосфорилирование, цитруллинизацию и другие. Эти модификации составляют «гистоновый код», управляющий структурой хроматина и экспрессией генов. Метилирование лизина 9 (K9; соответствует позиции 10 в полном прекурсоре) является критической эпигенетической меткой. Монометилированный H3K9 (H3K9me1) связан с транскрипционным сайленсингом и формированием гетерохроматина, а также может служить субстратом для дальнейшего метилирования специфическими метилтрансферазами.

Это кроличье моноклональное антитело было получено против синтетического монометилированного пептида в районе K9 человеческого гистона H3.1 (P68431), что позволяет специфически обнаруживать H3K9me1. Оно не распознает неметилированные или иначе метилированные формы (например, H3K9me2/me3), что подтверждено дизайном иммуногена.

Субклеточная локализация: Гистон H3 преимущественно локализуется в ядре и ассоциирован с хромосомами. Тканевая специфичность: Канонические варианты H3.1 экспрессируются в большинстве делящихся клеток, тогда как вариант H3.1t (Q16695) специфично экспрессируется в клетках яичек.

Связанные ссылки: PMID:11242053; PMID:16267050; PMID:17194708.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген представляет собой синтетический монометилированный пептид в районе K9; специфичность к H3K9me1 следует проверить с помощью пептидных конкурирующих анализов с использованием немодифицированных, моно-, ди- и триметилированных пептидов K9 в качестве отрицательных и положительных контролей.
• При вестерн-блоттинге (WB) и дот-блоттинге (DB) ожидается полоса/пятно размером примерно 16 кДа. Обеспечьте правильную экстракцию гистонов и нормализацию загрузки с помощью общего антитела к H3.
• Для иммуногистохимии (IHC-P) и иммунофлуоресценции (IF/ICC) оптимизируйте условия восстановления антигена и блокировки для каждого типа ткани/клетки, чтобы получить специфическое ядерное окрашивание.
• Иммунопреципитация хроматина (ChIP) с использованием этого антитела может картировать геномное распределение H3K9me1; сшивка и количество антитела требуют эмпирической оптимизации. Рассмотрите возможность последовательного ChIP для подтверждения специфичности монометилирования.
• Предполагается, что антитело перекрестно реагирует с широким спектром видов из-за высокой консервативности последовательности N-конца H3; рекомендуется валидация в соответствующей системе образцов (например, мышь, крыса).
• В ELISA антитело может использоваться в качестве реагента для захвата или детекции для количественного определения H3K9me1 в экстрагированных гистонах или нуклеосомах.

CamelBio: Ваш мост для комплексного снабжения

CamelBio предоставляет производителям диагностических средств, лабораториям и исследовательским институтам бесшовный комплексный доступ к премиальным реагентам для IVD и техническим услугам — от первоначальной концепции до клинического применения. Это кроличье mAb против монометил-Гистона H3-K9 поддерживает эпигенетические исследования и разработку анализов. Помимо этого продукта, CamelBio предлагает валидированные пары антител, оптимизированные поликлональные и моноклональные антитела, вспомогательные реагенты оптом, а также специализированный поиск редких эпигенетических мишеней. Сотрудничайте с CamelBio, чтобы оптимизировать вашу цепочку поставок и ускорить диагностические проекты.