Кроличье моноклональное антитело к MonoMethyl-Histone H3-K4 (Q16695/P68431) для вестерн-блоттинга, ChIP, IF/ICC и эпигенетических исследований

Основные характеристики и параметры продукта

Биологическая справка: функция и локализация гистона H3

Гистон H3 является основным компонентом нуклеосомы, которая упаковывает и компактизирует ДНК в хроматин. Эта компактизация ограничивает доступность ДНК для клеточных механизмов, которым требуется ДНК в качестве матрицы, тем самым играя центральную роль в регуляции транскрипции, репарации ДНК, репликации ДНК и хромосомной стабильности. Доступность ДНК тонко регулируется с помощью сложного набора посттрансляционных модификаций гистонов, известного как "гистоновый код", а также путем ремоделинга нуклеосом.

Гистон H3 локализуется в ядре и является неотъемлемой частью хромосом. Здесь важны два варианта: канонический гистон H3.1 (кодируемый множеством генов, таких как H3C1, H3C2 и т.д., SWISS P68431) экспрессируется повсеместно, тогда как гистон H3.1t (SWISS Q16695) специфичен для семенников. Оба выполняют одну и ту же фундаментальную роль в структуре хроматина.

Лизин 4 гистона H3 (H3K4) является основным сайтом для разнообразных посттрансляционных модификаций, включая моно-, ди- и триметилирование, ацетилирование и другие. Монометилирование H3K4 (H3K4me1) обычно ассоциировано с энхансерными регионами и активной транскрипцией генов. Это антитело получено против монометилированного пептида, окружающего H3K4, что обеспечивает специфичность к данному состоянию модификации.

Связанные ссылки: PMID:16267050, PMID:16457588, PMID:17194708.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Это антитело специфично к монометилированному H3K4. Для получения оптимальных результатов включайте в эксперимент положительные и отрицательные контрольные образцы (например, пептиды с немодифицированным, моно-, ди- или триметилированным K4) для подтверждения специфичности.
• Вестерн-блоттинг (WB): Используйте ядерные экстракты или лизаты целых клеток. Ожидается полоса примерно на 16 кДа. Оптимальное разведение первичного антитела определяйте эмпирически (например, начальный диапазон 1:500–1:2000) и используйте в паре с соответствующим вторичным антителом, конъюгированным с HRP.
• Иммунопреципитация хроматина (ChIP): Подходит для ChIP. Проводите сшивку хроматина, фрагментацию и иммунопреципитацию с антителом. Подтверждайте обогащение с помощью qPCR на известных сайтах-мишенях H3K4me1.
• Иммунофлуоресценция (IF/ICC): Надлежащим образом фиксируйте и пермеабилизируйте клетки. Ожидайте исключительно ядерное окрашивание. Контр-окрашивайте DAPI или аналогичным красителем для подтверждения локализации.
• IHC-P: Может потребоваться демаскировка антигена; оптимизируйте условия для каждого типа ткани.
• Дот-блоттинг (DB) и ELISA: Убедитесь, что концентрация пептида и условия блокировки оптимизированы для минимизации неспецифического связывания.
• Перекрестная реактивность: Это антитело распознает широкий спектр видов, включая растения (Arabidopsis, рис, пшеница). Для растительных образцов адаптируйте протоколы экстракции из-за жесткой клеточной стенки и оптимизируйте условия детекции.

CamelBio: Ваш мост к источникам "все в одном"

CamelBio предоставляет производителям диагностических систем, лабораториям и исследовательским институтам упрощенный доступ к высококачественным сырьевым материалам для in vitro диагностики (IVD). Это кроличье моноклональное антитело к MonoMethyl-Histone H3-K4 поддерживает передовые исследования в области эпигенетики и биологии хроматина. Помимо валидированных пар антител и оптимизированных моноклональных антител, CamelBio способствует оптовой закупке вспомогательных реагентов и поиску сырья для редких мишеней, ускоряя ваш путь от концепции до клиники.