Монометил-Histon H3-K36 кроличья моноклональная антитело (Q16695/P68431) для WB, DB, IP, ИФА, ChIP

Основные спецификации и параметры продукта

Биологические основы: функция и локализация монометил-Histon H3-K36

• Гистон H3 является основным компонентом нуклеосомы, который оборачивает и уплотняет ДНК, формируя хроматин. Эта структура ограничивает доступность ДНК и играет центральную роль в регуляции транскрипции, репарации ДНК, репликации ДНК и поддержании стабильности хромосом. Динамическая регуляция хроматина частично опосредуется сложной совокупностью посттрансляционных модификаций гистонов, которые принято называть гистоновым кодом.

• У человека канонические варианты гистона H3 кодируются несколькими генами. H3.1, представленный в базе SWISS под номером P68431, продукты которого соответствуют генам H3C1–H3C12, является основной формой, экспрессия которой зависит от репликации. Тестис-специфический вариант гистона H3, H3.1t (SWISS Q16695; также известный как H3/t или H3.4), экспрессируется исключительно в клетках семенников и может участвовать в реорганизации хроматина во время сперматогенеза.

• N-концевой хвост гистона H3 подвергается обширным посттрансляционным модификациям, включая метилирование специфичных остатков лизина. Монометилирование лизина 36 (H3K36me1) является одной из таких критически важных модификаций, которая соответствует метилированию Лиз-37 в канонической последовательности UniProt. Эта модификация была выявлена во многих протеомных исследованиях. Связанные источники: PMID:15983376, PMID:16185088, PMID:16267050, PMID:16627869, PMID:17194708

• H3K36me1 участвует в процессах элонгации транскрипции, сплайсинга пре-мРНК и репарации ДНК. Эта модификация устанавливается метилтрансферазами, такими как NSD1, NSD2 и SETD2 (которые также могут катализировать образование более высоких степеней метилирования), и удаляется гистоновыми деметилазами. По своему геномному распределению H3K36me1 обычно ассоциирована с транскрибируемыми участками генов, что подчеркивает её роль в регуляции экспрессии генов.

Рекомендации по проведению экспериментов и технические советы

• Иммуноген, использованный для получения данной антитела, представляет собой синтетический монометилированный пептид с центром в области K36 гистона H3 человека. При разработке и валидации экспериментальных протоколов учитывайте, что узнавание антителом мишени может зависеть от конкретного состояния метилирования (me1) и изменяться под влиянием соседних посттрансляционных модификаций. Для применения в иммунопреципитации хроматина (ChIP) убедитесь, что контекст целевого хроматина и специфичность антитела подтверждены с использованием подходящих положительных и отрицательных контролей.

• При вестерн-блоттинге ожидаемая полоса белка имеет молекулярную массу примерно 15 кДа. Для четкого разделения используйте гели с высоким процентом акриламида (например, 12–15% ПААГ в системе SDS) и оптимизированные условия переноса для низкомолекулярных белков. Для точной идентификации рекомендуется включать в эксперимент маркер гистонов или контроль общего гистона H3.

• Для ИФА и дот-блоттинга (DB) включение в схему эксперимента синтетических пептидов неметилированного, монометилированного, диметилированного и триметилированного H3K36 позволяет подтвердить специфичность узнавания именно модифицированного варианта.

• Для продукта указана широкая прогнозируемая перекрестная реактивность (человек, мышь, крыса и другие виды). Несмотря на то что это указывает на широкую совместимость с разными видами, настоятельно рекомендуется проводить валидацию для вашего конкретного вида и типа ткани, особенно при работе с нечеловеческими материалами.

• Для всех типов применения оптимальные рабочие разведения и условия эксперимента следует определять эмпирически с использованием релевантной системы проб.

CamelBio: ваш универсальный поставщик сырья

CamelBio — это ваш универсальный партнер по поиску сырья для ИВД, предоставляющий валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, вспомогательные реагенты в больших объемах и поиск редких мишеней для производителей диагностических тест-систем и исследовательских институтов по всему миру. Наш портфель включает целую линейку антител, специфичных к модифицированным гистонам, включая данную монометил-Histon H3-K36 кроличью моноклональную антитело, которая подходит для эпигенетических исследований и разработки диагностических тест-систем ИВД. Свяжитесь с CamelBio, чтобы узнать больше о кастомизированных сквозных решениях по поиску сырья, которые ускоряют разработку ваших диагностических продуктов от концепции до клинического применения.