Кроличье моноклональное антитело к моно-метилированному гистону H3-K36 (Q16695/P68431) для Вестерн-блоттинга, дот-блоттинга, ИГХ-П, ИФА

Основные характеристики и параметры продукта

Биологическая справка: функция и локализация гистона H3

Гистон H3 является основным компонентом нуклеосомы, которая упаковывает и уплотняет ДНК в хроматин. Это уплотнение ограничивает доступность ДНК для клеточных механизмов, которым требуется ДНК в качестве матрицы. Следовательно, гистоны играют центральную роль в регуляции транскрипции, репарации ДНК, репликации ДНК и хромосомной стабильности. Доступность ДНК регулируется через сложный набор посттрансляционных модификаций гистонов, известных под общим названием "гистоновый код", а также через ремоделирование нуклеосом. Связанные ссылки: UniProt Q16695, UniProt P68431

Несколько генов кодируют варианты гистона H3. В примечаниях и альтернативных названиях продукта указаны H3C2, H3C3, H3C4, H3C6, H3C7, H3C8, H3C10, H3C11, H3C12 и HIST1H3A, что отражает различные гены гистона H3.1, зависимые от репликации. Кроме того, тестис-специфичный вариант H3.1t (H3t, кодируемый H3-4 / HIST3H3) представлен SWISS-идентификатором Q16695. Эти варианты очень схожи по последовательности. Связанные ссылки: UniProt Q16695, UniProt P68431

На субклеточном уровне гистон H3 локализован в ядре и является основным компонентом хромосом. Его присутствие повсеместно в нуклеосомах по всему геному. Связанные ссылки: UniProt Q16695, UniProt P68431

Посттрансляционные модификации гистона H3, включая метилирование, ацетилирование, фосфорилирование и другие, тонко настраивают структуру и функцию хроматина. Моно-метилирование по лизину 36 (K36) является одной из таких модификаций. Данное антитело специфически детектирует моно-метилированную форму K36 и было получено с использованием синтетического моно-метилированного пептидного иммуногена, нацеленного на этот остаток. Связанные ссылки: UniProt Q16695, UniProt P68431

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Предполагаемая молекулярная масса гистона H3 составляет приблизительно 15 кДа. Однако из-за его сильно основного характера гистон H3 часто мигрирует при несколько более высокой кажущейся молекулярной массе в SDS-PAGE. Проверяйте конкретный характер миграции в вашей экспериментальной системе.
• Это антитело было получено против синтетического моно-метилированного пептида вокруг K36. Ожидается, что оно специфически распознает моно-метилированную форму в отличие от немодифицированного состояния или других состояний метилирования. Подтверждайте специфичность с помощью тестов конкурентного связывания пептидов или путем сравнения сигналов из клеточных лизатов, обработанных агентами, модифицирующими метилирование.
• Для Вестерн-блоттинга (WB) и дот-блоттинга (DB) рассмотрите возможность использования протоколов экстракции гистонов, которые обогащают ядерные белки, для повышения чувствительности детекции.
• При иммуногистохимии на парафиновых срезах (IHC-P) условия демаскировки антигена (например, цитратный буфер pH 6.0 или EDTA-буфер pH 9.0) могут потребовать оптимизации. Включайте известные положительные и отрицательные контрольные ткани для оценки специфичности окрашивания.
• ИФА можно использовать для высокопроизводительного скрининга или экспериментов по титрованию. Используйте это антитело в паре с подходящим вторичным анти-кроличьим антителом, конъюгированным с HRP или другим репортерным ферментом, для детекции.

CamelBio: Ваш единый мост для поставок

CamelBio предоставляет производителям диагностических систем и исследовательским институтам упрощенный доступ к комплексному портфелю сырья для ИВД. Для эпигенетических исследований и разработки анализов мы поставляем высококачественные антитела, такие как это кроличье моноклональное антитело к моно-метилированному гистону H3-K36, наряду с валидированными парами антител, оптимизированными моноклональными и поликлональными антителами, блокирующими буферами и вспомогательными реагентами оптом. Наша команда также предлагает решения по поиску редких антител, специфичных к модификациям, и производству рекомбинантных белков на заказ, помогая вам ускорить процесс разработки вашего диагностического продукта от концепции до клиники.