Кроличье моноклональное антитело к моно-метилированному гистону H3-K18 (Q16695/P68431) для ChIP & CUT&Tag | Вестерн-блоттинг, ИГХ-П, ИФ, ELISA

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация гистона H3

Гистоны являются основными белковыми компонентами хроматина, выступая в роли катушек, вокруг которых наматывается ДНК. Гистон H3 вместе с H2A, H2B и H4 формирует сердцевину нуклеосомы. Эти нуклеосомы компактизуют ДНК и регулируют ее доступность для транскрипции, репликации, репарации и поддержания хромосомной стабильности. N-концевой хвост гистона H3 подвергается множеству посттрансляционных модификаций (ПТМ), включая метилирование, ацетилирование, фосфорилирование и другие, которые в совокупности составляют "гистоновый код" и регулируют динамику хроматина и экспрессию генов.

Лизин 18 (K18) гистона H3 (соответствует позиции 19 в предшественнике) является ключевым остатком, который может быть моно-метилирован. Эта модификация, наряду с другими ПТМ в этом сайте, влияет на связывание эффекторных белков и модулирует структуру хроматина. В то время как ацетилирование K18 часто связано с активацией транскрипции, состояния метилирования могут иметь контекст-зависимые эффекты. Моно-метилирование H3K18 участвует в регуляции экспрессии генов и поддержании правильной функции хроматина.

Связанные ссылки: PMID:16267050, PMID:16627869, PMID:17194708.

Записи SWISS Q16695 (Histone H3.1t) и P68431 (Histone H3.1) представляют два варианта гистона H3 человека. Q16695 преимущественно экспрессируется в клетках семенников, где он замещает канонический H3.1 в процессе сперматогенеза. P68431 — это репликационно-зависимый гистон, экспрессируемый в соматических клетках и широко распространенный. Оба варианта локализуются в ядре и хромосомах.

Связанные ссылки: UniProt Q16695, UniProt P68431.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Антитело получено с использованием синтетического моно-метилированного пептида, соответствующего участку вокруг K18. Для обеспечения специфичности к моно-метилированной форме рекомендуется провести анализ конкурентного связывания с пептидом, используя соответствующий немодифицированный или ди-/три-метилированные пептиды на этапе первичной валидации.
• Для Вестерн-блоттинга (WB) в качестве исходного материала рекомендуются гистоновые экстракты из клеток человека, мыши или крысы. Ожидается специфичная полоса около 15 кДа. Используйте соответствующие контроли, включая антитело к общему H3, для подтверждения равной загрузки.
• В экспериментах по хроматин-иммунопреципитации (ChIP) и CUT&Tag критически важным является титрование антитела. Рекомендуется включать положительные контрольные геномные регионы, для которых известно наличие моно-метилирования H3K18 (если таковые имеются), и отрицательные контрольные локусы. Условия сшивания могут влиять на доступность эпитопа; рассмотрите как нативные, так и протоколы ChIP со сшиванием.
• Для иммуногистохимии (ИГХ-П) и иммунофлуоресценции (ИФ/ИЦХ) может потребоваться оптимизация условий демаскировки антигена. Для установления специфичности окрашивания рекомендуется использовать образцы тканей или клеток с документированным уровнем H3K18me1.
• Применения ELISA и дот-блоттинга (DB) могут быть использованы для быстрой проверки титра и специфичности антитела против пептидов с различным состоянием метилирования.

CamelBio: Ваш единый источник поставок

CamelBio стремится поддерживать производителей диагностических систем, исследовательские лаборатории и институты, предоставляя комплексный единый доступ к критически важным сырьевым материалам для ИВД. Данное кроличье моноклональное антитело к моно-метилированному гистону H3-K18 является примером нашего предложения в области эпигенетических исследований, где необходимы точные и специфичные реагенты. Помимо отдельных антител, экспертиза CamelBio в области поставок включает в себя валидированные пары антител для иммуноанализов, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, адаптированные под ваше применение, объемные вспомогательные реагенты и поддержку в закупке сырья для редких или новых мишеней. Мы стремимся оптимизировать ваш процесс разработки от концепции до клиники, обеспечивая эффективные и надежные поставки.