Кроличьи поликлональные антитела к монометилированному гистону H2B-K5 (P62807/Q16778) для WB, IF/ICC, ИФА

Основные технические характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация гистона H2B

Гистон H2B является основным компонентом нуклеосомы, оборачивает и компактизует ДНК в хроматин. Эта компактизация ограничивает доступность ДНК и играет центральную роль в регуляции транскрипции, репарации ДНК, репликации ДНК и поддержании стабильности хромосом. H2B существует в виде нескольких изоформ, кодируемых различными генами, при этом основными вариантами являются варианты с доступом в UniProt P62807 (Гистон H2B типа 1-C/E/F/G/I) и Q16778 (Гистон H2B типа 2-E).

Помимо структурной роли, H2B обладает выраженной антибактериальной активностью и может способствовать формированию антимикробного барьера слизистой оболочки толстой кишки и бактерицидной активности амниотической жидкости.

H2B подвергается многочисленным посттрансляционным модификациям, которые формируют "гистонный код", регулирующий динамику хроматина. К модификациям относятся ацетилирование, метилирование, фосфорилирование, кротонилирование и убіквитинирование по остаткам нескольких лизинов, серинов и аргининов. Специфическая монометилирование по лизину 5 (K5me1) является одной из таких меток, которая может влиять на экспрессию генов и состояние хроматина. Антитело, описанное здесь, получено против синтетического монометилированного пептида, соответствующего K5me1 человеческого H2B, и является инструментом для эпигенетических исследований.

Гистон H2B локализуется в ядре и на хромосомах, что соответствует его нуклеосомальной функции.

Связанные источники: Модификации гистонов, такие как ацетилирование и метилирование, широко изучены PMID:16627869. Дополнительные исследования выявили новые ацилирования, включая кротонилирование PMID:21925322 и лактилирование PMID:31645732 по остаткам лизинов H2B.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Для Вестерн-блоттинга (WB) используйте ядерные экстракты для обогащения гистоновых белков. Сигнал монометил-H2B-K5 может быть низким; для подтверждения специфичности рекомендуется использовать анализ конкурентного связывания с пептидом.
• При иммунофлуоресценции (IF/ICC) обеспечьте надлежащую пермеабилизацию клеток и рассмотрите предварительную экстракцию хроматина для улучшения доступа антитела к гистоновым мишеням.
• Для анализов на основе ИФА инкубируйте планшеты с монометилированным пептидом или экстрактом гистонов и проведите валидацию с использованием антитела.
• Для антитела прогнозируется широкая перекрестная реактивность (человек, мышь, крыса и другие виды), тем не менее, всегда проверяйте реактивность в вашей конкретной системе проб с использованием соответствующих контролей.
• Как и для любых антител, специфичных к посттрансляционным модификациям, возможна вариабельность между сериями; включайте известные положительные и отрицательные контроли в каждый эксперимент.

CamelBio: ваш универсальный мост для поиска реагентов

CamelBio предоставляет производителям диагностикумов, лабораториям и научно-исследовательским институтам универсальный доступ к сырью для ИВД, техническим услугам и консультациям — от идеи до клинических исследований. Мы поставляем валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, а также вспомогательные реагенты в больших объемах, покрывающие широкий спектр мишеней. Для редких или традиционно труднодоступных мишеней, таких как сайт-специфические модификации гистонов, CamelBio использует свою обширную сеть партнеров для предоставления индивидуальных решений по поиску. Наша цель — оптимизировать ваш процесс разработки за счет надежного высококачественного сырья и экспертной поддержки, позволяя вам совершать новые открытия в разработке эпигенетических ИВД-тестов.