Кроличье моноклональное антитело к MDA5 для Вестерн-блоттинга (WB) и ИФА (ELISA) - Q9BYX4

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическое предыстория: Функция и локализация MDA5

• Кодирует интерферон-индуцируемый белок 1 с доменом хеликазы C (IFIH1), также известный как MDA5, Helicard и RLR-2. Это цитоплазматический рецептор врожденного иммунитета, который распознает вирусную двуцепочечную РНК и кэппированную мРНК с дефицитом 2'-O-метилирования.
• При связывании с лигандом MDA5 взаимодействует с MAVS на митохондриях, запуская фосфорилирование, опосредованное TBK1/IKBKE, и активацию IRF3/IRF7, что приводит к продукции интерферона I типа и провоспалительных цитокинов. Связанные ссылки: PMID:28594402, PMID:32169843, PMID:33727702
• Выступает в качестве основного сенсора для пикорнавирусов (например, EMCV, риновирус), коронавирусов (включая SARS-CoV-2) и других РНК-вирусов, таких как вирус денге и вирус Западного Нила. Связанные ссылки: PMID:28606988, PMID:33440148, PMID:33514628
• Локализуется в цитоплазме, митохондриях и ядре, что согласуется с его ролью в распознавании вирусной РНК и передаче сигнала.
• Принадлежит к семейству RIG-I-подобных рецепторов (RLR), содержит два N-концевых домена CARD, домен хеликазы DExD/H-box и C-концевой регуляторный домен. Домен хеликазы связывает РНК зависимым от АТФ образом.
• Посттрансляционные модификации включают фосфорилирование и убиквитинирование, которые регулируют его активность и стабильность.
• Широко экспрессируется с более высокими уровнями в плаценте, поджелудочной железе и селезенке; мало в мозге, яичках и легких.
• Мутации, связанные с заболеваниями, в гене IFIH1 связаны с синдромом Айкарди-Гутьереса и сахарным диабетом, что подчеркивает его роль в аутоиммунитете.
• Кроме того, MDA5 может играть роль в ингибировании роста и апоптозе опухолевых клеток, а также усиливать функцию естественных киллерных клеток.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген охватывает C-концевую область (а.к. 900-1000) человеческого MDA5, которая консервативна у человека, мыши и крысы, что подтверждает заявленную перекрестную реактивность. Проверьте видоспецифичную реактивность в соответствующих матрицах образцов.
• Для Вестерн-блоттинга антитело может обнаруживать полосы на уровне ~117 кДа (полноценный MDA5) и, возможно, на уровне ~25 кДа; рекомендуется использование широкого диапазона молекулярных весов и положительных контролей, таких как клетки HeLa или A549, обработанные интерфероном.
• В ИФА (ELISA) титруйте антитело с использованием рекомбинантного MDA5 или иммунизирующего пептида для определения оптимальной рабочей концентрации; обеспечьте надлежащие этапы блокировки и отмывки.
• Поскольку MDA5 индуцируется интерфероном, рассмотрите возможность стимуляции клеток IFN-альфа/бета или вирусными миметиками (например, поли(I:C)) для повышения экспрессии мишени перед лизисом.

CamelBio: Ваш мост для комплексных закупок

CamelBio предоставляет производителям диагностических средств, лабораториям и научно-исследовательским институтам комплексный доступ к реагентам для IVD, техническим услугам и консультациям — охватывая все этапы от концепции до клиники. Это кроличье моноклональное антитело к MDA5 является частью нашего портфеля высококачественных иммунологических реагентов для исследований врожденного иммунитета и вирусологии. Помимо антител, мы поставляем валидированные пары антител, вспомогательные реагенты оптом и специализированный поиск сырья для редких мишеней, упрощая ваш конвейер разработки анализов.