Кроличье поликлональное антитело к лактилированному гистону H3 (K14) для Вестерн-блоттинга/ИФА (Q16695/P68431)

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация гистона H3

Гистон H3 является основным компонентом нуклеосомы, необходимым для упаковки ДНК в хроматин и регуляции доступности ДНК во время транскрипции, репарации, репликации и поддержания хромосомной стабильности. Он формирует гистоновый октамер вместе с H2A, H2B и H4. Связанные ссылки: UniProt Q16695 | UniProt P68431

Две основные изоформы, представленные SWISS-акцессиями, — это гистон H3.1t (Q16695), который специфически экспрессируется в клетках семенников, и канонический гистон H3.1 (P68431), кодируемый множеством генов и широко экспрессируемый. Оба обладают высокой гомологией последовательностей, включая остаток лизина 14, который является мишенью данного антитела.

Гистон H3 подвергается обширному спектру посттрансляционных модификаций (ПТМ), которые составляют гистоновый код, влияя на экспрессию генов и динамику хроматина. Эти ПТМ включают ацетилирование, метилирование, фосфорилирование, цитруллинирование и лактилирование. Лактилирование по остаткам лизина было идентифицировано в нескольких положениях гистона H3 (например, K10, K19, K24, K28, K57, K80), как сообщалось в недавних исследованиях. Связанные ссылки: PMID:31645732

Субклеточная локализация гистона H3 преимущественно ядерная, где он ассоциирован с хромосомами на протяжении всего клеточного цикла.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Использованный иммуноген представляет собой синтетический лактилированный пептид вокруг K14 человеческого гистона H3. Для подтверждения специфичности антитела рассмотрите возможность использования недектилированного (контрольного) пептида или проведения тестов на конкурентное связывание с пептидом.
• Для Вестерн-блоттинга (WB) прогнозируемая молекулярная масса гистона H3 составляет приблизительно 15 кДа, но подготовка образцов и условия разделения (например, кислотная экстракция или ядерные экстракты с высоким содержанием соли) могут влиять на детекцию. Проведите валидацию анализа в соответствующей клеточной или тканевой системе.
• Для ИФА убедитесь, что лактилированный антиген правильно презентирован. Прямой или сэндвич-форматы ИФА могут быть оптимизированы с использованием пептида или рекомбинантного белка.
• Хотя ожидается, что антитело будет реагировать с широким спектром видов (человек, мышь, крыса и другие) из-за консервативности последовательности вокруг сайта модификации, перекрестную реактивность следует экспериментально подтверждать для каждого нового вида или типа образца.
• Поскольку лактилирование гистонов является динамической ПТМ, рассмотрите возможность применения соответствующих метаболических стимулов или условий окружающей среды для обогащения модификацией перед анализом.

CamelBio: Ваш универсальный мост для поставок

CamelBio служит производителям диагностических систем, исследовательским лабораториям и институтам в качестве комплексного, универсального партнера по поставкам сырья для ИХД. От валидированных пар антител и оптимизированных моноклональных/поликлональных антител до объемных вспомогательных реагентов и закупки сырья для редких мишеней — мы соединяем концепцию с клинической практикой. Для исследователей и разработчиков, фокусирующихся на модификациях гистонов и эпигенетике, это антитело к лактилированному гистону H3 (K14) кролика предлагает специализированный инструмент для исследования биомаркеров и разработки анализов.