[Валидировано на KO] IRF3 Rabbit mAb - Q14653

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическое предыстория: Функция и локализация IRF3

• IRF3 является ключевым регулятором транскрипции иммунных ответов, зависимых от интерферонов I типа (IFN), играющим важную роль в врожденном иммунитете против ДНК- и РНК-содержащих вирусов. Он регулирует транскрипцию генов интерферона I типа (IFN-альфа и IFN-бета) и генов, индуцируемых интерфероном (ISG), связываясь с элементами ответа на стимуляцию интерфероном (ISRE) в их промоторах. Связанные ссылки: PMID:22394562 PMID:24049179 PMID:25636800 PMID:11846977 PMID:16846591 PMID:16979567
• В незараженных клетках IRF3 находится в цитоплазме в неактивной форме. При вирусной инфекции, наличии двухцепочечной РНК (dsRNA) или сигнализации через толл-подобные рецепторы (TLR) он фосфорилируется киназами IKBKE и TBK1, что индуцирует конформационные изменения, приводящие к димеризации, транслокации в ядро и ассоциации с CREBBP для формирования комплекса dsRNA-активированного фактора 1 (DRAF1), который активирует гены интерферона I типа и ISG. Связанные ссылки: PMID:22394562 PMID:25636800 PMID:27302953 PMID:16154084 PMID:33440148
• IRF3 может активировать различные программы экспрессии генов в макрофагах и индуцировать значительный апоптоз в первичных макрофагах. В ответ на инфекцию вирусом Сендай IRF3 рекрутируется белком TOMM70:HSP90AA1 в митохондрии, где он формирует апоптотический комплекс TOMM70:HSP90AA1:IRF3:BAX, индуцирующий апоптоз. Связанные ссылки: PMID:16846591 PMID:25609812
• IRF3 является ключевым фактором транскрипции, регулирующим ответ интерферона во время инфекции SARS-CoV-2. Связанные ссылки: PMID:33440148
• Субклеточная локализация включает цитоплазму, ядро и митохондрии, что соответствует его динамической регуляции в процессе сигнализации.
• Посттрансляционные модификации включают фосфорилирование (критическое для активации), ацетилирование, образование дисульфидных связей, изопептидную связь и конъюгацию Ubl.
• Конститутивно экспрессируется в различных тканях, что подчеркивает его широкую роль в противовирусной защите.
• Альтернативный сплайсинг приводит к образованию нескольких изоформ, что потенциально модулирует его функцию в различных контекстах.

Экспериментальное руководство и технические советы

• Иммуноген соответствует аминокислотам 1-260 человеческого IRF3 (NP_001184051.1), покрывая N-концевую область, которая включает ДНК-связывающий и регуляторный домены. Эта конструкция может обнаруживать как нефосфорилированные, так и фосфорилированные формы, что делает ее подходящей для мониторинга общего уровня IRF3.
• Для Вестерн-блоттинга рекомендуется использовать лизаты клеток, стимулированных вирусными миметиками (например, поли(I:C)) или интерферонами, для наблюдения за активационным сдвигом полос, указывающим на фосфорилирование. Проведите валидацию в соответствующей системе образцов, например, в инфицированных вирусом или активированных через TLR клетках.
• При иммуноцитохимии и иммунофлуоресценции следует оптимизировать методы восстановления антигена и соответствующей фиксации для сохранения нативной конформации IRF3, особенно учитывая его фосфорилирование-зависимую транслокацию в ядро.
• Для иммунопреципитации обеспечьте мягкие условия лизиса для поддержания белок-белковых взаимодействий, так как IRF3 образует комплексы с партнерами, такими как CREBBP и TBK1.
• Реактивность антитела с видами мышь и крыса (на основе гомологии последовательностей) позволяет проводить межвидовые исследования, но рекомендуется проверить реактивность в конкретной экспериментальной модели.

CamelBio: Ваш мост для комплексных закупок

CamelBio предоставляет производителям диагностических средств, лабораториям и научно-исследовательским институтам комплексный доступ к реагентам для IVD, техническим услугам и консультациям, охватывая все этапы от концепции до клиники. Как надежный партнер в исследованиях иммунноонкологии и инфекционных заболеваний, мы предлагаем валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, вспомогательные реагенты оптом и поддержку в закупке сырья для редких мишеней. С этим моноклональным антителом против IRF3 мы расширяем возможности ваших исследований врожденного иммунитета и противовирусных ответов, обеспечивая надежные поставки для ваших диагностических и исследовательских потребностей.