[Валидировано на KO] Расщепленный Газдермин E (N-концевой) Кроличий Моноклональный Антитело для WB, IHC-P, ELISA - O60443

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический фон: Функция и локализация Газдермина E

• Газдермин E (GSDME), также известный как DFNA5 или ICERE-1, является членом семейства газдермина — белков, образующих поры. Он экспрессируется в виде предшественника, который расщепляется с высвобождением активного N-концевого фрагмента; при альтернативном сплайсинге образуется несколько изоформ.
• При расщеплении каспазой-3 (CASP3) или гранзимом B (GZMB) в позиции Asp270 N-концевой фрагмент транслокируется в плазматическую мембрану, олигомеризуется и образует поры с внутренним диаметром 10–15 нм, вызывая пироптоз и высвобождение воспалительных цитокинов, таких как IL-1β и IL-16. Связанные ссылки: PMID:27281216, PMID:28459430, PMID:32188940, PMID:33852854
• Опосредованный GSDME пироптоз действует как механизм подавления опухоли: гранзим B, доставляемый естественными киллерами (NK-клетками), расщепляет GSDME в опухолевых клетках, индуцируя пироптоз и мощный противоопухолевый иммунитет. Связанные ссылки: PMID:21522185, PMID:32188940, PMID:31953257
• Находясь ниже по потоку от митохондриального пути апоптоза и повреждения ДНК, GSDME может переключать апоптоз на вторичный некроз и пироптоз, частично посредством сигналинга p53/TP53. Связанные ссылки: PMID:28045099, PMID:16897187
• GSDME обладает бактерицидной активностью и способствует пироптозу в ответ на микробные инфекции, включая индуцированный вирусом Зика пироптоз плаценты, который влияет на исход плода. Связанные ссылки: PMID:27281216
• Что касается субклеточной локализации, полноразмерный GSDME в основном находится в цитоплазме, тогда как расщепленный N-концевой фрагмент локализуется в клеточной мембране, где образует поры.
• GSDME экспрессируется в улитке и на низком уровне во многих тканях, с самой высокой экспрессией в плаценте. Мутации в гене связаны с аутосомно-доминантным несиндромальным нарушением слуха. Связанные ссылки: PMID:9771715
• Посттрансляционные модификации, включая пальмитоилирование и образование изопептидных связей, могут регулировать активацию GSDME и его встраивание в мембрану.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген антитела разработан вокруг сайта расщепления Asp270, что делает его специфичным к N-концевому фрагменту. Проверьте специфичность в вашей экспериментальной системе, используя соответствующие положительные и отрицательные контроли (например, необработанные образцы по сравнению с индукторами апоптоза/пироптоза).
• Для вестерн-блоттинга ожидайте появление нескольких полос из-за нерасщепленного предшественника (~55 кДа) и расщепленных фрагментов (N-концевой ~11 кДа и 35 кДа, в зависимости от изоформы). Оптимизируйте условия нанесения и детекции для различения этих форм.
• Для IHC-P выполните retrieval антигена и протестируйте серию разведений для достижения оптимального окрашивания. Антитело было валидировано для образцов человека; перекрестная реактивность с другими видами не сообщалась, поэтому подтвердите реактивность при использовании тканей не человека.
• Для ELISA рассмотрите возможность пары со специфичным к C-концу антителом для сэндвич-ELISA для количественного определения расщепленного GSDME. Проведите пилотные эксперименты для установления чувствительности и динамического диапазона.
• В исследованиях пироптоза контролируйте расщепление как считываемый результат; комбинируйте с анализами активности каспазы-3 или детекцией гранзима B для получения механистических данных.

CamelBio: Ваш комплексный мост поставок

CamelBio является комплексным поставщиком реагентов для IVD, предлагая валидированные антитела, антигены и вспомогательные реагенты для диагностических и исследовательских применений. Это антитело к Газдермину E поддерживает исследования пироптоза, опухолевой иммунологии и нарушений слуха. Вам нужны оптовые поставки, разработка кастомных антител или поиск редких мишеней — интегрированная платформа CamelBio оптимизирует закупки от открытия до клинического внедрения.