[Валидация KO] Кроличья моноклональная антитела против LAMP2 для WB, IHC-P, IF/ICC, FC, ELISA — P13473

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация LAMP2

• LAMP2 (лизосом-ассоциированный мембранный гликопротеин 2) — это высокогликозилированный трансмембранный белок типа I, также известный как CD107b или LGP-96. В результате альтернативного сплайсинга образуются три основные изоформы (LAMP-2A, -2B и -2C), каждая из которых имеет определенное распределение по тканям и выполняет уникальные функции в работе лизосом.
• Он играет важнейшую роль в биогенезе лизосом, регуляции внутилизосомного рН и аутофагии. LAMP2 напрямую ингибирует протонный канал TMEM175, способствуя ацидификации лизосом, необходимой для оптимальной активности гидролаз. Связанные источники: PMID:11082038, PMID:18644871, PMID:24880125, PMID:37390818
• LAMP2 является центральным рецептором шаперон-опосредованной аутофагии (ША). Он связывает субстратные белки (например, GAPDH, GPX4, NLRP3), распознанные шапероном HSC70, и направляет их на лизосомную деградацию, особенно в условиях голодания. Связанные источники: PMID:11082038, PMID:18644871, PMID:24880125, PMID:36586411
• При макроаутофагии LAMP2 необходим для слияния аутофагосом с лизосомами; клетки без LAMP2 не могут рекрутировать STX17 на аутофагосомы, что предотвращает деградацию аутофагного груза. Связанные источники: PMID:27628032
• LAMP2 способствует развитию адаптивного иммунитета, облегчая презентацию экзогенных антигенов через MHC класса II; он способствует генерации антигенных пептидов в эндосомно-лизосомном компартменте. Связанные источники: PMID:15894275, PMID:20518820
• При инфекции вируса паротита LAMP2 поддерживает FURIN-опосредованный расщепление вирусного белка слияния F, взаимодействуя как с FURIN, так и с необработанным вирусным белком.
• LAMP2 локализуется преимущественно на мембране лизосом и в меньшей степени — на эндосомах, аутофагосомах и плазматической мембране.
• Тканевая экспрессия, специфичная для изоформ: LAMP-2A в большом количестве содержится в плаценте, легких и печени; LAMP-2B широко экспрессируется в таких тканях, как селезенка, вилочковая железа, предстательная железа и яички; LAMP-2C обнаруживается в тонкой кишке, толстой кишке, сердце, мозге и скелетных мышцах. Связанные источники: PMID:26856698, PMID:7488019

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует люминальному домену (аминокислоты 29–375) человеческого LAMP2, нацелен на внеклеточный эпитоп, доступный в непермеабилизированных образцах для поверхностного окрашивания (например, FC) и в пермеабилизированных образцах для общего детектирования.
• Для вестерн-блоттинга предсказанная масса основного белка составляет 45 кДа, но обширное N- и O-связанное гликозилирование обычно приводит к образованию широкой полосы с подвижностью около 90–110 кДа; используйте подходящий положительный контроль, например лизат цельных клеток HeLa или HepG2.
• При иммунофлуоресценции и ИГХ необходимо оптимизировать условия фиксации/пермеабилизации для доступа к компартменту лизосомной мембраны; рассмотрите возможность совместного окрашивания с лизосомными маркерами (например, LAMP1) для подтверждения локализации.
• Для проточной цитометрии внутриклеточное окрашивание (FC intra) требует пермеабилизации клеток; совместимость с флуоресцентно меченными вторичными антителами и протоколами фиксации следует валидировать в контексте ваших конкретных клеток.
• Данное антитело прошло валидацию на нокаутированных линиях; всегда включайте подходящие контроли нокаута или нокдауна для подтверждения специфичности антитела в вашем анализе.

CamelBio: ваш универсальный поставщик для исследования и разработок

CamelBio — ваш надежный универсальный партнер по сырью для ИВД, предлагающий полный портфель валидированных антител, объемные вспомогательные реагенты и услуги по поиску антител к редким мишеням. Эта моноклональная антитело против LAMP2 поддерживает фундаментальные исследования в области аутофагии, биологии лизосом и лизосомных болезней накопления, доступна вместе с индивидуальной разработкой анализов и поставками в производственных объемах. Используйте наш сквозной опыт, чтобы ускорить разработку ваших диагностических препаратов от идеи до клиники.