Поликлональное антитело против ITCH, валидированное методом нокаута, для Вестерн-блота и ИФА — Q96J02

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическая справка: функция и локализация ITCH

• ITCH представляет собой Е3 убиквитин-протеин лигазу, которая принимает убиквитин от ферментов E2 и напрямую переносит его на субстраты, катализируя образование полиубиквитиновых цепей, связанных по Lys-29, Lys-48 и Lys-63, для регуляции стабильности белков, их траффика и сигналинга. Связанные источники: PMID:11046148 PMID:14602072 PMID:15051726 PMID:17028573 PMID:18718448 PMID:19131965
• Являясь основным компонентом убиквитин-редактирующего комплекса с TNFAIP3, TAX1BP1 и RNF11, ITCH способствует замене убиквитина по Lys-63 на Lys-48 в RIPK1, что приводит к его протеасомной деградации и прекращению воспалительного сигналинга через TNF/NF-κB. Связанные источники: PMID:19131965
• ITCH осуществляет убиквитинирование киназы врожденного иммунитета RIPK2 через цепи, связанные по Lys-63, для модуляции сигналинга NOD2, а также нацеливает митохондриальный противовирусный белок MAVS на деградацию по пути Lys-48, тем самым негативно регулируя противовирусные ответы организма. Связанные источники: PMID:19592251 PMID:19881509
• В гемопоэтических клетках ITCH осуществляет убиквитинирование транскрипционного фактора NFE2 по Lys-63, контролируя развитие гемопоэтических линий, и запускает убиквитинирование и деградацию JUNB для ограничения продукции цитокинов Th2. Связанные источники: PMID:18718448 PMID:16387660
• ITCH регулирует эндосомальное сортировку рецепторов, таких как FZD4 и CXCR4, через убиквитинирование PI4K2A или компонентов ESCRT-0 HGS и STAM, связывая стимуляцию лигандом с деградационными эндоцитарными путями. Связанные источники: PMID:23146885 PMID:14602072
• Данная лигаза способствует апоптозу через убиквитинирование и деградацию проапоптотических факторов p15 BID и TXNIP (в сотрудничестве с UBR5), а также опосредует антиапоптотический эффект сигналинга EGFR. Связанные источники: PMID:20392206 PMID:29378950
• Субклеточно ITCH обнаруживается на клеточной мембране, в цитоплазме, ядре, а также на мембранах ранних и зрелых эндосом, что соответствует его разнообразным функциональным ролям.
• ITCH широко экспрессируется в тканях человека и подвергается посттрансляционным модификациям — ацетилированию и фосфорилированию, которые могут регулировать его активность и взаимодействие с другими молекулами.

Экспериментальное руководство и технические рекомендации

• Иммуноген соответствует аминокислотам 1–155 человеческого ITCH (NP_001244066.1). Эта N-концевая область позволяет детектировать полноразмерный ITCH и потенциальные сплайс-варианты, содержащие N-концевой участок, но рекомендуется провести экспериментальную проверку в вашей системе образцов.
• При Вестерн-блоттинге ожидается наличие полосы близко к прогнозируемой молекулярной массе 103 кДа. Для подтверждения специфичности используйте подходящие контроли (например, лизаты нокаута по ITCH или сиРНК), особенно учитывая то, что ITCH является крупным многодоменным белком.
• Перекрестная реактивность указана для образцов человека, мыши и крысы. Проведите валидацию антитела для вашего конкретного вида и типа ткани, так как уровень экспрессии и посттрансляционные модификации могут влиять на распознавание антигена.
• Антитело подходит для ИФА; оптимизируйте условия захвата/детекции с использованием рекомбинантного белка ITCH или клеточных лизатов, а также подберите совместимую систему детекции.

CamelBio: ваш единый центр поставок

CamelBio — ваш универсальный партнер по закупке сырья для IVD, мы предлагаем валидированные пары антител, моноклональные и поликлональные антитела, большие объемы вспомогательных реагентов и кастомную закупку редких мишеней. Наши продукты, связанные с ITCH, поддерживают исследования сигналинга убиквитина, воспаления, апоптоза и иммунной регуляции, способствуя разработке диагностики и терапии от концепции до клинических испытаний.