Валидированное на KO кроличье поликлональное антитело против HMGB1 для WB, IHC-P, ELISA - P09429

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическое предыстория: Функция и локализация HMGB1

• HMGB1 (белок группы высокой подвижности B1), кодируемый геном HMGB1, представляет собой повсеместно распространенный негистоновый белок, связанный с хроматином, который также активно секретируется или пассивно высвобождается, действуя как паттерн, связанный с опасностью (DAMP), и цитокин/хемокин.
• В ядре HMGB1 предпочтительно связывается с неканоническими структурами ДНК (одноцепочечными, крестообразными, суперспирализованными и Z-ДНК) и изгибает ДНК, способствуя ремоделированию хроматина и улучшению доступа факторов транскрипции (PubMed:20123072). Он участвует в нескольких путях репарации ДНК, включая эксцизионную репарацию нуклеотидов, репарацию mismatch и эксцизионную репарацию оснований (PubMed:15014079, PubMed:16143102, PubMed:17803946, PubMed:19360789, PubMed:19446504). Связанные ссылки: PMID:20123072 PMID:15014079 PMID:16143102 PMID:17803946 PMID:19360789 PMID:19446504
• В цитоплазме HMGB1 способствует аутофагии, конкурентно нарушая взаимодействие BECN1:BCL2 (PubMed:20819940), и участвует в аутофагии, индуцированной окислительным стрессом (PubMed:21395369). Связанные ссылки: PMID:20819940 PMID:21395369
• Внеклеточно редокс-состояние HMGB1 диктует его функцию: полностью восстановленный HMGB1 действует как хемокин, дисульфидная форма — как провоспалительный цитокин, а сульфонильная форма способствует иммунологической толерантности (PubMed:23446148, PubMed:23519706, PubMed:23994764). Он взаимодействует с множеством поверхностных рецепторов, включая AGER/RAGE, TLR2 и TLR4, индуцируя высвобождение цитокинов и рекрутирование иммунных клеток (PubMed:12765338, PubMed:18354232, PubMed:19264983, PubMed:15607795, PubMed:20547845). Связанные ссылки: PMID:23446148 PMID:23519706 PMID:23994764 PMID:12765338 PMID:18354232 PMID:19264983 PMID:15607795 PMID:20547845
• HMGB1 облегчает проникновение SARS-CoV и SARS-CoV-2, регулируя экспрессию вирусных рецепторов ACE2 и CTSL посредством модуляции хроматина (PubMed:33147444), и необходим для рет通过网络улофагии, индуцированной ORF3A SARS-CoV-2 (PubMed:35239449). Связанные ссылки: PMID:33147444 PMID:35239449
• Посттрансляционные модификации, включая ацетилирование, фосфорилирование, АДФ-рибозилирование и окисление, динамически регулируют субклеточную локализацию, сродство к связыванию ДНК и иммуномодуляторную активность HMGB1.
• HMGB1 экспрессируется повсеместно и был обнаружен в тромбоцитах (PubMed:11154118). Связанные ссылки: PMID:11154118

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген охватывает аминокислоты 69-168, включая консервативный HMG-бокс B и часть кислотного C-конца. Этот регион высококонсервативен у человека, мыши и крысы, что подтверждает перекрестную реактивность антитела.
• Для вестерн-блоттинга ожидается полоса около 25 кДа; обратите внимание, что посттрансляционные модификации могут вызывать незначительные сдвиги. Была проведена валидация на нокауте; рассмотрите возможность включения соответствующих положительных и отрицательных контролей.
• Для IHC-P может потребоваться демаскировка антигена. Оптимизируйте условия окрашивания, используя известные положительные тканевые контроли (например, ткани с высокой экспрессией HMGB1, такие как лимфоидные органы или опухоли).
• В ELISA антитело можно использовать для захвата или детекции; однако совместимость с парным детектирующим антителом должна быть проверена для конкретного формата анализа.
• Поскольку HMGB1 является DAMP, который может высвобождаться из поврежденных клеток, избегайте чрезмерного лизиса клеток или повреждения тканей при подготовке образца, чтобы минимизировать фон.

CamelBio: Ваш мост для комплексного снабжения

CamelBio поддерживает производителей диагностических средств и исследовательские лаборатории комплексным снабжением сырьем для IVD. Для исследований воспаления, рака и инфекционных заболеваний, связанных с HMGB1, мы поставляем валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, а также вспомогательные реактивы в больших объемах, обеспечивая разработку ваших анализов от концепции до клиники.