[KO Валидировано] Поликлональное антитело против HER2/ErbB2 для Вестерн-блоттинга, ИФА - P04626

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация HER2/ErbB2

• HER2/ErbB2 — это рецепторная тирозин-протеинкиназа, кодируемая геном ERBB2 (GeneID: 2064), и член семейства рецепторов эпидермального фактора роста (EGFR/ErbB). Полноразмерный белок представляет собой односпиральный белок типа I мембраны из 1255 аминокислот с предсказанной молекулярной массой 137,9 кДа (наблюдается примерно при 138 кДа).
• Он функционирует как корецептор в комплексах неурогулин-рецептор, необходимых для лиганд-зависимой передачи сигнала, но для высокоаффинного связывания лиганда и активации киназы требует гетеродимеризации с другими членами семейства ErbB (например, EGFR, ErbB3, ErbB4).
• Сигналинг HER2 регулирует рост и стабилизацию периферических микротрубочек через путь MEMO1-RHOA-DIAPH1, ингибируя GSK3B и способствуя мембранной ассоциации APC и CLASP2, что, в свою очередь, облегчает захват и стабилизацию микротрубочек.
• В ядре HER2 действует как транскрипционный регулятор, связываясь с промотором PTGS2/COX-2 (последовательность 5’-TCAAATTC-3’) для активации транскрипции, а также способствует экспрессии CDKN1A через вовлечение STAT3 и SRC, а также транскрипции генов рРНК РНК-полимеразой I, усиливая синтез белка и рост клеток.
• Субклеточная локализация включает клеточную мембрану, мембрану выростов (ruffle membrane), ранние эндосомы, цитоплазму (перинуклеарная область) и ядро, что отражает его разнообразные сигнальные и транскрипционные роли.
• HER2 сверхэкспрессируется в различных опухолевых тканях, включая первичный рак молочной железы, тонкой кишки, пищевода, почки и полости рта, что делает его критически важным биомаркером и терапевтической мишенью.
• Ключевые посттрансляционные модификации включают фосфорилирование (фосфопротеин) и гликозилирование; белок также содержит сигнальный пептид, дисульфидные связи, а также альтернативные инициаторные и сплайсинговые изоформы.
• Ключевые слова UniProt подчеркивают его биологические роли: активатор, альтернативный сплайсинг, АТФ-связывание, клеточная мембрана, вариант заболевания, киназа, рецептор, сигнал, регуляция транскрипции, трансфераза, трансмембранный.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Последовательность иммуногена (а.о. 1156–1255) расположена в C-концевом цитоплазматическом домене HER2; следовательно, ожидается, что это антитело будет распознавать полноразмерную форму (~138 кДа) в Вестерн-блоттинге (WB), с возможным детектированием усеченных или альтернативно сплайсированных изоформ, если они сохраняют этот эпитоп.
• Для WB используйте восстанавливающие условия; зрелый гликозилированный и фосфорилированный белок может мигрировать немного выше. Проверяйте специфичность полосы с использованием HER2-положительных и -отрицательных клеточных линий (например, SK-BR-3 против MCF-7) и, при наличии, валидированных KO лизатов, как указано в валидации продукта.
• В применениях ИФА из-за внутриклеточной локализации эпитопа рассмотрите возможность использования пептидного покрытия или прямого захвата антигена. Оптимизируйте условия покрытия и разведения антител в соответствующих матрицах образцов.
• Из-за высокой экспрессии в опухолях лизаты из клеточных линий рака молочной железы или опухолевых тканей могут давать сильные сигналы; включайте соответствующие контроли загрузки и нормализуйте к общему белку.

CamelBio: Ваш универсальный мост для поставок

CamelBio — ваш комплексный B2B-партнер для сырья для ИВД, поддерживающий производителей диагностических средств, клинические лаборатории и научно-исследовательские институты от концепции до клиники. С этим поликлональным антителом против HER2/ErbB2 мы предоставляем надежный реагент для исследований онкологических биомаркеров, разработки анализов и сопутствующей диагностики. Помимо антител, наш портфель включает валидированные пары антител, моноклональные/поликлональные варианты, объемные вспомогательные реагенты и услуги поиска редких мишеней, обеспечивая успех вашего проекта за счет упрощенного доступа к критически важным материалам.