[Валидация KO] Поликлональное антитело кролика против CD133 для ВБ, ИФ/ИКК, ИП, ИФА - O43490

Основные технические характеристики и параметры продукта

Биологическая информация: функция и локализация Проминина-1

• Проминин-1 (также известный как AC133, CD133) представляет собой трансмембранный гликопротеин, кодируемый геном PROM1; альтернативный сплайсинг приводит к образованию нескольких изоформ с разным распределением по тканям.
• Он участвует в процессах клеточной дифференцировки, пролиферации и апоптоза. Связанные источники: PMID:24556617
• Данный белок связывает холестерин в микродоменах плазматической мембраны и участвует в организации апикальной плазматической мембраны эпителиальных клеток.
• На ранних стадиях развития сетчатки проминин-1 выступает как ключевой регулятор морфогенеза дисков, что подчеркивает его важность для структуры фоторецепторов.
• В нейробластомных клетках он подавляет нейронную дифференцировку (рост нейритов) путем механизма, зависящего от RET. Связанные источники: PMID:20818439
• Субклеточная локализация включает апикальную клеточную мембрану, микроворсинки, реснички, внешние сегменты фоторецепторов и промежуточный компартмент эндоплазматической сети и аппарата Гольджи.
• Изоформа 1 является общепризнанным маркером CD34+ гемопоэтических стволовых и прогениторных клеток, тогда как изоформа 2 преимущественно экспрессируется в фетальной печени, скелетной мускулатуре, почках, сердце и поджелудочной железе взрослого организма, а также в почках, печени, легких и плаценте взрослого организма.
• Были обнаружены посттрансляционные модификации, такие как ацетилирование, фосфорилирование и гликозилирование, которые могут влиять на функцию белка и его молекулярную массу в анализах.
• Мутации в гене PROM1 связаны с наследственными дистрофиями сетчатки, включая пигментную дистрофию сетчатки по типу колбочка-стержень и болезнь Штаргардта.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген (аа 179–433) нацелен на внеклеточный домен, что особенно полезно для мечения поверхности в ИФ/ИКК; для изучения клеточной локализации обеспечьте оптимальные условия фиксации и пермеабилизации.
• При вестерн-блоттинге учитывайте, что CD133 сильно гликозилирован; теоретическая масса составляет ~97 кДа, но наблюдаемая полоса при электрофорезе может мигрировать медленнее (иметь большую кажущеюся массу). Используйте восстановительные/денатурирующие условия и проводите валидацию с положительным контролем (например, стволовыми клетками) наряду со стратегией отрицательного контроля, валидированного с помощью нокаутированного образца (KO).
• При проведении иммунопреципитации рекомендуется использовать мягкие лизирующие буферы, сохраняющие целостность мембранных белков, а также оптимизировать концентрацию антитела для каждой экспериментальной системы.
• В ИФА антитело можно использовать как в качестве захватывающего, так и детектирующего реагента; рекомендуется подобрать комплементарное детектирующее антитело и провести валидацию с рекомбинантным белком CD133.
• Поскольку это поликлональное антитело кролика, возможна вариабельность между разными сериями; рекомендуется титровать каждую новую серию для планируемого применения и подтверждать специфичность в соответствующей матрице образца.

CamelBio: ваш универсальный источник реагентов для исследований

CamelBio выступает как универсальный поставщик сырья для ИВД (in vitro диагностики), поддерживая проекты на всех этапах от разработки концепции до клинических испытаний. Дополните это антитело против CD133 нашим портфелем валидированных пар антител, оптимизированных моноклональных/поликлональных антител и вспомогательных реагентов в больших объемах, адаптированных для исследований стволовых клеток и онкологических исследований. Свяжитесь с нами для поиска реагентов к редким мишеням или получения технической консультации, чтобы ускорить разработку ваших диагностических продуктов.